Prejsť na obsah
KLE
Tkanivo
Maternica, endometrium
Choroba
Adenokarcinóm endometria

Dokumenty

KLE

Cell line · Číslo výrobku 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia KLE je adherentná bunková línia odvodená z endometria bielej pacientky s adenokarcinómom. Táto bunková línia bola vytvorená zo 64-dňovej pacientky a odvtedy sa stala dôležitým nástrojom vo výskume rakoviny endometria. Bunky KLE uložil GR Richardson a sú známe svojimi tumorigénnymi vlastnosťami, keďže pri subkutánnej inokulácii do nahých myší vytvárajú nádory do 21 dní so 100 % frekvenciou. Tieto nádory netvoria žľazy, ale vykazujú mikroklky, junkčné komplexy a systémy jadrových kanálov podobné tým, ktoré sa nachádzajú v normálnom endometriu pri progestačnej stimulácii.

Bunky KLE exprimujú krvnú skupinu O a sú Rh-pozitívne, čo môže byť dôležité pre špecifické štúdie zahŕňajúce expresiu antigénu. Bunková línia sa bežne používa na štúdium patofyziológie karcinómu endometria, pričom je obzvlášť zaujímavý jej stav negatívny na estrogénové receptory a pozitívny na progesterónové receptory. Vďaka tomuto receptorovému profilu sú bunky KLE veľmi vhodné na výskum úlohy progesterónu pri progresii karcinómu endometria. Štúdie elektrónovej mikroskopie nádorov odvodených z buniek KLE poskytli podrobný pohľad na bunkovú ultraštruktúru, vďaka čomu je táto bunková línia základným zdrojom pre pochopenie morfologických aspektov adenokarcinómu endometria.

Tkanivo
Maternica, endometrium
Choroba
Adenokarcinóm endometria

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Tumorigenický
Áno, nádory sa vyvinuli do 21 dní so 100 % frekvenciou (5/5) u nahých myší, ktorým bolo subkutánne podaných 1×107 buniek.
Doba zdvojnásobenia
114 hodín

04Identifikátory

Citácia
KLE (katalógové číslo Cytion 305051)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Krvná skupina O, Rh+

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
64 rokov
Etnická príslušnosť
Európska