Siirry sisältöön
KLE
Kudos
Kohdun, kohdun limakalvo
Sairaus
Endometriumin adenokarsinooma

Asiakirjat

KLE

Cell line · Tuotenumero 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KLE-solulinja on tarttuva solulinja, joka on peräisin valkoihoisen naispotilaan, jolla on adenokarsinooma, kohdun limakalvosta. Tämä solulinja perustettiin 64 päivää vanhasta potilaasta, ja siitä on sittemmin tullut tärkeä väline kohdun limakalvosyövän tutkimuksessa. KLE-solut ovat GR Richardsonin tallettamia, ja ne ovat tunnettuja tuumorigeenisistä ominaisuuksistaan, sillä ne muodostavat kasvaimia 21 päivän kuluessa 100-prosenttisella taajuudella, kun ne inokuloidaan ihon alle alastomiin hiiriin. Nämä kasvaimet eivät muodosta rauhasia, mutta niissä on mikrovilloja, liitoskomplekseja ja ydinkanavajärjestelmiä, jotka ovat samanlaisia kuin normaalissa kohdun limakalvossa progestageenin stimuloimana.

KLE-solut ilmentävät veriryhmää O ja ovat Rh-positiivisia, mikä voi olla merkityksellistä antigeenien ilmentymistä koskevissa erityistutkimuksissa. Solulinjaa käytetään yleisesti endometriumin karsinooman patofysiologian tutkimiseen, ja erityisen kiinnostavaa on sen estrogeenireseptorinegatiivinen ja progesteronireseptoripositiivinen asema. Tämän reseptoriprofiilin ansiosta KLE-solut soveltuvat erinomaisesti tutkimukseen, jossa tutkitaan progesteronin roolia endometriumsyövän etenemisessä. KLE-soluista peräisin olevien kasvainten elektronimikroskopiatutkimukset ovat antaneet yksityiskohtaista tietoa solujen ultrastruktuurista, minkä vuoksi tämä solulinja on tärkeä resurssi endometriumin adenokarsinooman morfologisten näkökohtien ymmärtämisessä.

Kudos
Kohdun, kohdun limakalvo
Sairaus
Endometriumin adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, kasvaimia kehittyi 21 päivän kuluessa 100 %:n tiheydellä (5/5) alastomilla hiirillä, joille oli annettu ihonalaisesti 1×107 solua.
Kaksinkertaistumisaika
114 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KLE (Cytionin tuotenumero 305051)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Veriryhmä O, Rh+

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
64 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen