Gå til innholdet
KLE
Vev
Livmor, livmorslimhinne
Sykdom
Endometrieadenokarsinom

Dokumenter

KLE

Cell line · Produktnummer 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KLE-cellelinjen er en adherent cellelinje som stammer fra endometriet til en hvit, kvinnelig pasient med adenokarsinom. Denne cellelinjen ble etablert fra en 64 dager gammel pasient, og har siden blitt et viktig verktøy i forskning på endometriecancer. KLE-cellene ble deponert av GR Richardson og er kjent for sine tumorigeniske egenskaper, ettersom de danner svulster i løpet av 21 dager med 100 % frekvens når de inokuleres subkutant i nakne mus. Disse svulstene danner ikke kjertler, men har mikrovilli, junksjonskomplekser og nukleolære kanalsystemer som ligner dem man finner i normalt endometrium under gestagenstimulering.

KLE-celler uttrykker blodtype O og er Rh-positive, noe som kan være relevant for spesifikke studier som involverer antigenuttrykk. Cellelinjen brukes ofte til å studere patofysiologien ved endometriecancer, og det er spesielt interessant at den er østrogenreseptor-negativ og progesteronreseptor-positiv. Denne reseptorprofilen gjør KLE-cellene svært godt egnet for forskning på progesterons rolle i utviklingen av endometriecancer. Elektronmikroskopistudier av KLE-celleavledede svulster har gitt detaljert innsikt i den cellulære ultrastrukturen, noe som gjør denne cellelinjen til en viktig ressurs for å forstå de morfologiske aspektene ved endometrieadenokarsinom.

Vev
Livmor, livmorslimhinne
Sykdom
Endometrieadenokarsinom

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumorinduserende
Ja, svulster utviklet seg innen 21 dager med 100 % frekvens (5/5) hos nakne mus som ble podet subkutant med 1×107 celler.
Fordoblingstid
114 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KLE (Cytion-katalognummer 305051)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Blodtype O, Rh+

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisitet
Europeisk