Pāriet uz saturu
KLE
Audums
Dzemde, endometrijs
Slimība
Endometrija adenokarcinoms

Dokumenti

KLE

Cell line · Preces numurs 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KLE šūnu līnija ir adherentu šūnu līnija, kas iegūta no baltās sievietes, pacientes ar adenokarcinomu, endometrija. Šī šūnu līnija tika izveidota no 64 dienas vecas pacientes, un kopš tā laika ir kļuvusi par būtisku instrumentu endometrija vēža pētniecībā. KLE šūnas deponēja GR Richardson, un tās ir pazīstamas ar savām tumorigēnajām īpašībām, jo 21 dienas laikā tās veido audzējus ar 100 % biežumu, ja tās subkutāni inokulē kailām pelēm. Šie audzēji neveido dziedzerus, bet tiem ir mikrovilas, savienojuma kompleksi un kodolu kanālu sistēmas, kas ir līdzīgas tām, kuras atrodamas normālā endometrijā progestācijas stimulācijas ietekmē.

KLE šūnas izsaka O asinsgrupu un ir Rh pozitīvas, kas var būt svarīgi specifiskiem pētījumiem, kas saistīti ar antigēnu ekspresiju. Šūnu līniju parasti izmanto, lai pētītu endometrija karcinomas patofizioloģiju, īpašu uzmanību pievēršot tās estrogēnu receptoru negatīvajam un progesterona receptoru pozitīvajam statusam. Šis receptoru profils padara KLE šūnas ļoti piemērotas pētījumiem par progesterona lomu endometrija vēža progresēšanā. Elektronmikroskopijas pētījumi ar KLE šūnu audzējiem ir ļāvuši iegūt detalizētu ieskatu šūnu ultrastruktūrā, padarot šo šūnu līniju par būtisku resursu, lai izprastu endometrija adenokarcinomas morfoloģiskos aspektus.

Audums
Dzemde, endometrijs
Slimība
Endometrija adenokarcinoms

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā, audzēji attīstījās 21 dienu laikā ar 100 % biežumu (5/5) kailām pelēm, kurām subkutāni tika ievadītas 1×107 šūnas.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
114 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KLE (Cytion kataloga numurs 305051)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
O asinsgrupa, Rh+

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
64 gadi
Etniskā piederība
Eiropas