الانتقال إلى المحتوى
KLE
الأنسجة
الرحم، بطانة الرحم
المرض
سرطان بطانة الرحم الغدي الغدي

المستندات

KLE

Cell line · رقم المنتج 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا KLE هو خط خلوي ملتصق مشتق من بطانة الرحم لمريضة بيضاء مصابة بسرطان بطانة الرحم. تم إنشاء هذا الخط الخلوي من مريضة تبلغ من العمر 64 يوماً وأصبح منذ ذلك الحين أداة حيوية في أبحاث سرطان بطانة الرحم. تم إيداع خلايا KLE بواسطة GR ريتشاردسون وهي معروفة بخصائصها المولدة للأورام، حيث أنها تشكل أوراماً خلال 21 يوماً بتكرار 100% عند تلقيحها تحت الجلد في الفئران العارية. لا تُشكّل هذه الأورام غدداً ولكنها تُظهر أوراماً مجهرية ومجمعات وصلية وأنظمة قنوات نووية مشابهة لتلك الموجودة في بطانة الرحم الطبيعية تحت التحفيز البروجستيني.

تُعبّر خلايا KLE عن فصيلة الدم O وهي إيجابية العامل الريسوسي، والتي يمكن أن تكون ذات صلة بدراسات محددة تتضمن التعبير عن المستضد. يُستخدم هذا الخط الخلوي بشكل شائع لدراسة الفيزيولوجيا المرضية لسرطان بطانة الرحم، مع اهتمام خاص بحالة مستقبلات الإستروجين السلبية ومستقبلات البروجسترون الإيجابية. هذا المظهر الجانبي للمستقبلات يجعل خلايا KLE مناسبة للغاية للبحث في دور البروجسترون في تطور سرطان بطانة الرحم. وفرت دراسات الفحص المجهري الإلكتروني للأورام المشتقة من خلايا KLE رؤى مفصلة عن البنية التحتية الخلوية، مما يجعل هذا الخط الخلوي مصدراً أساسياً لفهم الجوانب المورفولوجية لسرطان بطانة الرحم الغدية.

الأنسجة
الرحم، بطانة الرحم
المرض
سرطان بطانة الرحم الغدي الغدي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، تطورت الأورام في غضون 21 يومًا بنسبة 100٪ (5/5) في الفئران العارية التي تم تلقيحها تحت الجلد بـ 1×107 خلية.
زمن المضاعفة
114 ساعة

04المعرّفات

المرجع
KLE (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305051)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1329

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
فصيلة الدم O، عامل ريزوس+

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
64 سنة
الأصل العرقي
أوروبي