Перейти до вмісту
KLE
Тканина
Матка, ендометрій
Хвороба
Аденокарцинома ендометрію

Документи

KLE

Cell line · Номер товару 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія KLE - це адгезійна клітинна лінія, отримана з ендометрію білої пацієнтки з аденокарциномою. Ця клітинна лінія була отримана від 64-денної пацієнтки і з тих пір стала життєво важливим інструментом у дослідженні раку ендометрію. Клітини KLE були депоновані GR Richardson і відомі своїми туморогенними властивостями, оскільки вони утворюють пухлини протягом 21 дня зі 100% частотою при підшкірному введенні голим мишам. Ці пухлини не утворюють залоз, але демонструють мікроворсинки, суглобові комплекси та системи нуклеолярних каналів, подібні до тих, що виявляються в нормальному ендометрії під час прогестаційної стимуляції.

Клітини KLE експресують групу крові O і є резус-позитивними, що може мати значення для специфічних досліджень, пов'язаних з експресією антигенів. Клітинна лінія широко використовується для вивчення патофізіології карциноми ендометрія, з особливим інтересом до її негативного статусу по відношенню до рецепторів естрогену і позитивного статусу по відношенню до рецепторів прогестерону. Такий рецепторний профіль робить клітини KLE дуже придатними для дослідження ролі прогестерону в прогресуванні раку ендометрія. Електронно-мікроскопічні дослідження пухлин, отриманих з клітин KLE, дозволили детально вивчити клітинну ультраструктуру, що робить цю клітинну лінію важливим ресурсом для розуміння морфологічних аспектів аденокарциноми ендометрія.

Тканина
Матка, ендометрій
Хвороба
Аденокарцинома ендометрію

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний
Пухлиноутворювальний
Так, пухлини розвинулися протягом 21 дня з частотою 100% (5/5) у голих мишей, яким підшкірно ввели 1×107 клітин.
Час подвоєння
114 годин

04Ідентифікатори

Посилання
KLE (номер у каталозі Cytion 305051)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1329

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
Група крові O, Rh+

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
64 роки
Етнічна приналежність
Європейський