Gå direkte til indholdet
KLE
Væv
Livmoder, endometrium
Sygdom
Endometrial adenokarcinom

Dokumenter

KLE

Cell line · Varenummer 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KLE-cellelinjen er en adhærent cellelinje, der stammer fra endometriet hos en hvid, kvindelig patient med adenokarcinom. Denne cellelinje blev etableret fra en 64 dage gammel patient og er siden blevet et vigtigt redskab i forskning i endometriecancer. KLE-cellerne blev deponeret af GR Richardson og er kendt for deres tumorigeniske egenskaber, da de danner tumorer inden for 21 dage med en frekvens på 100 %, når de inokuleres subkutant i nøgne mus. Disse tumorer danner ikke kirtler, men udviser mikrovilli, forbindelseskomplekser og nukleolære kanalsystemer svarende til dem, der findes i normalt endometrium under progestationel stimulering.

KLE-celler udtrykker blodtype O og er Rh-positive, hvilket kan være relevant for specifikke undersøgelser, der involverer antigenekspression. Cellelinjen bruges ofte til at studere patofysiologien ved endometriekarcinom, med særlig interesse for dens østrogenreceptor-negative og progesteronreceptor-positive status. Denne receptorprofil gør KLE-celler meget velegnede til forskning i progesterons rolle i udviklingen af endometriecancer. Elektronmikroskopiske undersøgelser af KLE-celleafledte tumorer har givet detaljeret indsigt i den cellulære ultrastruktur, hvilket gør denne cellelinje til en væsentlig ressource til forståelse af de morfologiske aspekter af endometrieadenokarcinom.

Væv
Livmoder, endometrium
Sygdom
Endometrial adenokarcinom

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Tumorfremkaldende
Yeees, der udviklede sig tumorer inden for 21 dage med en frekvens på 100 % (5/5) hos nude-mus, der blev inokuleret subkutant med 1×107 celler.
Fordoblingstid
114 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KLE (Cytion-katalognummer 305051)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Blodtype O, Rh+

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk