Přejít na obsah
KLE
Tkáň
Děloha, endometrium
Nemoc
Adenokarcinom endometria

Dokumenty

KLE

Cell line · Číslo výrobku 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie KLE je adherentní buněčná linie odvozená z endometria bílé pacientky s adenokarcinomem. Tato buněčná linie byla vytvořena z 64 dní staré pacientky a od té doby se stala důležitým nástrojem ve výzkumu karcinomu endometria. Buňky KLE byly uloženy společností GR Richardson a jsou známy svými tumorigenními vlastnostmi, neboť při subkutánní inokulaci do nahých myší vytvářejí nádory do 21 dnů se 100% frekvencí. Tyto nádory netvoří žlázy, ale vykazují mikrovily, junkční komplexy a systémy nukleárních kanálků podobné těm, které se nacházejí v normálním endometriu při progestační stimulaci.

Buňky KLE exprimují krevní skupinu O a jsou Rh pozitivní, což může být důležité pro specifické studie zahrnující expresi antigenů. Tato buněčná linie se běžně používá ke studiu patofyziologie karcinomu endometria, přičemž zvláštní zájem je o její negativitu estrogenových receptorů a pozitivitu progesteronových receptorů. Díky tomuto receptorovému profilu jsou buňky KLE velmi vhodné pro výzkum role progesteronu v progresi karcinomu endometria. Studie elektronové mikroskopie nádorů odvozených z buněk KLE poskytly detailní pohled na buněčnou ultrastrukturu, což z této buněčné linie činí základní zdroj pro pochopení morfologických aspektů adenokarcinomu endometria.

Tkáň
Děloha, endometrium
Nemoc
Adenokarcinom endometria

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Tumorogenní
Ano, nádory se vyvinuly do 21 dnů se 100% frekvencí (5/5) u nahých myší, kterým bylo podkožně naočkováno 1×107 buněk.
Doba zdvojnásobení
114 hodin

04Identifikátory

Citace
KLE (katalogové číslo Cytion 305051)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Krevní skupina O, Rh+

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
64 let
Etnická příslušnost
Evropská