İçeriğe atla
KLE
Doku
Uterus, Endometrium
Hastalık
Endometrial adenokarsinom

KLE

Cell line · Ürün numarası 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KLE hücre hattı, adenokarsinomlu Beyaz, kadın bir hastanın endometriyumundan türetilen yapışık bir hücre hattıdır. Bu hücre hattı 64 günlük bir hastadan oluşturulmuştur ve o zamandan beri endometriyal kanser araştırmalarında hayati bir araç haline gelmiştir. KLE hücreleri GR Richardson tarafından depolanmıştır ve çıplak farelere deri altından aşılandıklarında 21 gün içinde %100 sıklıkta tümör oluşturdukları için tümörijenik özellikleriyle bilinmektedir. Bu tümörler bez oluşturmaz ancak progestasyonel stimülasyon altında normal endometriyumda bulunanlara benzer mikrovilluslar, birleşme kompleksleri ve nükleolar kanal sistemleri sergiler.

KLE hücreleri kan grubu O'yu ifade eder ve Rh-pozitiftir, bu da antijen ekspresyonunu içeren spesifik çalışmalar için uygun olabilir. Hücre hattı, östrojen reseptörü-negatif ve progesteron reseptörü-pozitif durumuyla özellikle ilgilenilerek, endometriyal karsinomun patofizyolojisini incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu reseptör profili, KLE hücrelerini progesteronun endometriyal kanser ilerlemesindeki rolüne ilişkin araştırmalar için son derece uygun hale getirmektedir. KLE hücresi türevi tümörlerin elektron mikroskobu çalışmaları, hücresel ultrastrüktür hakkında ayrıntılı bilgiler sağlayarak bu hücre hattını endometriyal adenokarsinomun morfolojik yönlerini anlamak için önemli bir kaynak haline getirmiştir.

Doku
Uterus, Endometrium
Hastalık
Endometrial adenokarsinom

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Evet, 1×107 hücre ile deri altına aşılanan çıplak farelerde 21 gün içinde %100 sıklıkla (5/5) tümörler gelişti.
İki katına çıkma süresi
114 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KLE (Cytion katalog numarası 305051)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Kan Grubu O, Rh+

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
64 yıl
Etnik köken
Avrupa