Pereiti prie turinio
KLE
Audinys
Gimda, endometriumas
Liga
Endometriumo adenokarcinomas

Dokumentai

KLE

Cell line · Prekės numeris 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KLE ląstelių linija yra adherentinė ląstelių linija, gauta iš adenokarcinoma sergančios baltosios lyties pacientės endometriumo. Ši ląstelių linija buvo sukurta iš 64 dienų pacientės ir nuo to laiko tapo svarbia priemone endometriumo vėžio tyrimams. KLE ląsteles deponavo GR Richardson ir jos yra žinomos dėl savo navikinių savybių, nes 100 % dažnumu per 21 dieną suformuoja navikus, kai yra įskiepijamos po oda nuogoms pelėms. Šie navikai nesudaro liaukų, tačiau pasižymi mikrovilteliais, jungčių kompleksais ir branduolių kanalų sistemomis, panašiomis į tas, kurios randamos normaliame endometriume, stimuliuojamame progestaciniais preparatais.

KLE ląstelės išreiškia O kraujo grupę ir yra Rh teigiamos, o tai gali būti svarbu atliekant specifinius tyrimus, susijusius su antigeno raiška. Ši ląstelių linija paprastai naudojama endometriumo karcinomos patofiziologijai tirti, ypatingą susidomėjimą kelia jos neigiamas estrogenų receptorių ir teigiamas progesterono receptorių statusas. Dėl tokio receptorių profilio KLE ląstelės labai tinka progesterono vaidmens endometriumo vėžio progresavimui tyrimams. Elektroninės mikroskopijos tyrimai su KLE ląstelių išvestais navikais leido išsamiai susipažinti su ląstelių ultrastruktūra, todėl ši ląstelių linija yra labai svarbus šaltinis siekiant suprasti endometriumo adenokarcinomos morfologinius aspektus.

Audinys
Gimda, endometriumas
Liga
Endometriumo adenokarcinomas

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Tumorogeninis
Taip, navikai išsivystė per 21 dieną 100 % dažniu (5/5) nuogosioms pelėms, kurioms buvo po oda įskiepytos 1×107 ląstelės.
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
114 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
KLE (Cytion katalogo numeris 305051)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Kraujo tipas O, Rh+

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
64 metai
Etninė priklausomybė
Europos