Przejdź do treści
KLE
Chusteczka
Macica, endometrium
Choroba
Gruczolakorak endometrium

Dokumenty

KLE

Cell line · Numer produktu 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa KLE to przylegająca linia komórkowa pochodząca z endometrium białej pacjentki z gruczolakorakiem. Ta linia komórkowa została utworzona od 64-dniowej pacjentki i od tego czasu stała się istotnym narzędziem w badaniach nad rakiem endometrium. Komórki KLE zostały zdeponowane przez GR Richardson i są znane ze swoich właściwości nowotworowych, ponieważ tworzą guzy w ciągu 21 dni ze 100% częstotliwością po inokulacji podskórnej u nagich myszy. Guzy te nie tworzą gruczołów, ale wykazują mikrokosmki, kompleksy połączeń i systemy kanałów jąderkowych podobne do tych występujących w normalnym endometrium pod wpływem stymulacji progestagenowej.

Komórki KLE wyrażają grupę krwi O i są Rh-dodatnie, co może być istotne dla konkretnych badań obejmujących ekspresję antygenów. Ta linia komórkowa jest powszechnie wykorzystywana do badania patofizjologii raka endometrium, ze szczególnym uwzględnieniem ujemnego statusu receptora estrogenowego i dodatniego statusu receptora progesteronowego. Ten profil receptora sprawia, że komórki KLE są bardzo odpowiednie do badań nad rolą progesteronu w progresji raka endometrium. Badania mikroskopii elektronowej guzów pochodzących z komórek KLE zapewniły szczegółowy wgląd w ultrastrukturę komórkową, czyniąc tę linię komórkową niezbędnym źródłem do zrozumienia morfologicznych aspektów gruczolakoraka endometrium.

Chusteczka
Macica, endometrium
Choroba
Gruczolakorak endometrium

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Nowotworotwórczy
Tak, guzy rozwinęły się w ciągu 21 dni z częstotliwością 100% (5/5) u nagich myszy, którym podskórnie zaszczepiono 1×107 komórek.
Czas podwojenia
114 godzin

04Identyfikatory

Źródło
KLE (numer katalogowy Cytion 305051)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Grupa krwi O, Rh+

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
64 lata
Pochodzenie etniczne
Europejski