Mine otse sisu juurde
KLE
Kude
Emakas, emakas, endomeetrium
Haigus
Endomeetriumi adenokartsinoom

Dokumendid

KLE

Cell line · Toote number 305051

The KLE cell line is an adherent cell line derived from the endometrium of a White, female patient with adenocarcinoma. This cell line was established fro...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KLE rakuliin on valge naissoost patsiendi adenokartsinoomiga endomeetriumist saadud adherentne rakuliin. See rakuliin loodi 64 päeva vanuselt patsiendilt ja sellest on saanud oluline vahend endomeetriumivähi uurimisel. KLE rakud deponeeris GR Richardson ja need on tuntud oma tumorigeensete omaduste poolest, kuna nad moodustavad 21 päeva jooksul 100% sagedusega kasvajaid, kui neid süstitakse subkutaanselt alasti hiirtele. Need kasvajad ei moodusta näärmeid, kuid neil on mikrovillid, ühenduskompleksid ja tuumakanalite süsteemid, mis on sarnased normaalses endomeetriumis esinevate süsteemidega progestageense stimulatsiooni korral.

KLE rakud väljendavad veregruppi O ja on Rh-positiivsed, mis võib olla oluline antigeenide ekspressiooniga seotud spetsiifilistes uuringutes. Seda rakuliini kasutatakse tavaliselt endomeetriumi kartsinoomi patofüsioloogia uurimiseks, kusjuures erilist huvi pakub selle östrogeeniretseptor-negatiivne ja progesterooniretseptor-positiivne staatus. See retseptoriprofiil muudab KLE rakud väga sobivaks progesterooni rolli uurimiseks endomeetriumi vähi progresseerumisel. KLE rakkudest saadud kasvajate elektronmikroskoopilised uuringud on andnud üksikasjaliku ülevaate raku ultrastruktuurist, mis muudab selle rakuliini oluliseks ressursiks endomeetriumi adenokartsinoomi morfoloogiliste aspektide mõistmiseks.

Kude
Emakas, emakas, endomeetrium
Haigus
Endomeetriumi adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah, kasvajad tekkisid 21 päeva jooksul 100% sagedusega (5/5) alasti hiirtel, kellele süstiti naha alla 1×107 rakku.
Kahekordistumisaeg
114 tundi

04Tunnused

Viide
KLE (Cytioni katalooginumber 305051)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1329

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Veregrupp O, Rh+

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
64 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa