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NCI-H2452
Tissu
Poumon
Maladie
Mésothéliome biphasique pleural
Synonymes
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Documents

NCI-H2452

Cell line · Référence du produit 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire NCI-H2452 est une lignée cellulaire humaine de mésothéliome pleural malin, dérivée de la plèvre d'un patient atteint de mésothéliome. Elle est fréquemment utilisée dans la recherche visant à comprendre la physiopathologie du mésothéliome et à développer de nouvelles approches thérapeutiques. Comme d'autres lignées cellulaires de mésothéliome, NCI-H2452 est associée à une exposition aux fibres d'amiante, un facteur de risque bien établi pour le mésothéliome. Les études portant sur NCI-H2452 ont mis en évidence son utilité dans l'exploration des mécanismes de progression de la maladie et de réponse à diverses thérapies, en particulier les thérapies géniques et les approches d'oncolyse virale.

Les cellules NCI-H2452 expriment le récepteur de Coxsackie et de l'adénovirus (CAR) et le CD46, ce qui en fait des candidats appropriés pour les études de thérapie génique à base d'adénovirus. Dans le cadre de la recherche sur la virothérapie oncolytique, l'adénovirus de type 5 (Ad5) et une variante modifiée par des fibres (Ad5F35) ont été testés sur les cellules NCI-H2452. Ces adénovirus se répliquent sélectivement dans les cellules tumorales, induisant une oncolyse en fonction des particules virales. Il a été constaté que l'Ad5 et l'Ad5F35 présentaient une efficacité similaire dans l'induction de la mort cellulaire dans les cellules NCI-H2452, ce qui confirme leur potentiel dans la thérapie génique du mésothéliome malin.

Outre leur rôle dans la virothérapie oncolytique, les cellules NCI-H2452 ont été utilisées pour étudier l'angiogenèse tumorale, un facteur clé dans la progression du mésothéliome. NCI-H2452 exprime la progranuline (PGRN) et les protéines de type granuline, qui ont été identifiées comme de nouveaux facteurs angiogéniques fonctionnant indépendamment de la voie du VEGF. Cette angiogenèse indépendante du VEGF est cruciale, car elle offre des cibles thérapeutiques alternatives dans les cas où les thérapies anti-VEGF comme le bevacizumab ne parviennent pas à améliorer les résultats pour les patients. La recherche indique que ces granulines contribuent de manière significative à la formation de nouveaux vaisseaux sanguins, ce qui favorise la croissance des tumeurs et peut être impliqué dans la résistance à certains traitements.

Tissu
Poumon
Maladie
Mésothéliome biphasique pleural
Synonymes
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
NCI-H2452 (numéro de catalogue Cytion 300391)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
Adulte
Origine ethnique
Européen