Tartalomra ugrás
NCI-H2452
Szövet
Tüdő
Betegség
Pleurális kétfázisú mesothelioma
Szinonimák
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Dokumentumok

NCI-H2452

Cell line · Termékszám 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCI-H2452 sejtvonal egy humán rosszindulatú pleurális mesothelioma sejtvonal, amelyet egy mesotheliomás beteg mellhártyájából nyertek. Gyakran használják a mezotelióma patofiziológiájának megértésére és új terápiás megközelítések kifejlesztésére irányuló kutatásokban. Más mezotelióma-sejtvonalakhoz hasonlóan az NCI-H2452 is kapcsolatban áll az azbesztszálaknak való kitettséggel, ami a mezotelióma jól ismert kockázati tényezője. Az NCI-H2452-vel végzett tanulmányok rávilágítottak arra, hogy az NCI-H2452 hasznos a betegség progressziójának és a különböző terápiákra, különösen a génterápiákra és a vírusos onkolízisre adott válaszmechanizmusok feltárásában.

Az NCI-H2452 sejtek Coxsackie- és adenovírus-receptort (CAR) és CD46-ot expresszálnak, ami alkalmassá teszi őket adenovírus alapú génterápiás vizsgálatokra. Az onkolitikus viroterápiát vizsgáló kutatások során az NCI-H2452 sejteken mind az 5-ös típusú adenovírust (Ad5), mind pedig egy rostmódosított változatát (Ad5F35) tesztelték. Ezek az adenovírusok szelektíven szaporodnak a tumorsejtekben, és vírusrészecske-függő módon indukálják az onkolízist. Megállapítottuk, hogy mind az Ad5, mind az Ad5F35 hasonló hatékonyságot mutatott az NCI-H2452 sejtek sejtpusztulásának kiváltásában, ami alátámasztja a malignus mesothelioma génterápiájában való potenciáljukat.

Az onkolitikus viroterápiában betöltött szerepe mellett az NCI-H2452 sejteket a tumor angiogenezisének tanulmányozására is felhasználták, amely a mezotelióma progressziójának egyik kulcstényezője. Az NCI-H2452 expresszálja a progranulint (PGRN) és a granulinszerű fehérjéket, amelyeket a VEGF útvonaltól függetlenül működő új angiogén faktorokként azonosítottak. Ez a VEGF-független angiogenezis kulcsfontosságú, mivel alternatív terápiás célpontokat kínál azokban az esetekben, amikor a VEGF-ellenes terápiák, mint például a bevacizumab, nem javítják a betegek kimenetelét. A kutatások azt mutatják, hogy ezek a granulinok jelentősen hozzájárulnak az új erek kialakulásához, ami támogatja a tumor növekedését, és szerepet játszhat az egyes kezelésekkel szembeni rezisztenciában.

Szövet
Tüdő
Betegség
Pleurális kétfázisú mesothelioma
Szinonimák
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
NCI-H2452 (Cytion katalógusszám: 300391)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Felnőtt
Etnikai hovatartozás
Európai