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NCI-H2452
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Mesotelioma pleural bifásico
Sinónimos
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Documentos

NCI-H2452

Cell line · Número de producto 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

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01Información general

Descripción

La línea celular NCI-H2452 es una línea celular humana de mesotelioma pleural maligno derivada de la pleura de un paciente con mesotelioma. Se utiliza con frecuencia en investigaciones centradas en la comprensión de la fisiopatología del mesotelioma y el desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos. Al igual que otras líneas celulares de mesotelioma, la NCI-H2452 está asociada a la exposición a fibras de amianto, un factor de riesgo de mesotelioma bien establecido. Los estudios realizados con NCI-H2452 han puesto de relieve su utilidad para explorar los mecanismos de progresión de la enfermedad y la respuesta a diversas terapias, en particular las terapias génicas y los enfoques de oncolisis vírica.

Las células NCI-H2452 expresan el receptor de Coxsackie y adenovirus (CAR) y CD46, lo que las convierte en candidatas idóneas para estudios de terapia génica basada en adenovirus. En las investigaciones sobre la viroterapia oncolítica, tanto el adenovirus de tipo 5 (Ad5) como una variante modificada en fibra (Ad5F35) se han ensayado en células NCI-H2452. Estos adenovirus se replican selectivamente dentro de las células tumorales, induciendo la oncólisis de forma dependiente de las partículas virales. Se comprobó que tanto Ad5 como Ad5F35 mostraban una eficacia similar en la inducción de la muerte celular en células NCI-H2452, lo que respalda su potencial en la terapia génica del mesotelioma maligno.

Además de su papel en la viroterapia oncolítica, las células NCI-H2452 se han utilizado para estudiar la angiogénesis tumoral, un factor clave en la progresión del mesotelioma. Las células NCI-H2452 expresan progranulina (PGRN) y proteínas similares a la granulina, que se han identificado como nuevos factores angiogénicos que actúan independientemente de la vía del VEGF. Esta angiogénesis independiente del VEGF es crucial, ya que ofrece dianas terapéuticas alternativas en los casos en que las terapias anti-VEGF, como el bevacizumab, no consiguen mejorar los resultados de los pacientes. Las investigaciones indican que estas granulinas contribuyen significativamente a la formación de nuevos vasos sanguíneos, lo que favorece el crecimiento tumoral y puede estar implicado en la resistencia a determinados tratamientos.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Mesotelioma pleural bifásico
Sinónimos
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
NCI-H2452 (número de catálogo de Cytion 300391)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
Adultos
Origen étnico
Europea