Przejdź do treści
NCI-H2452
Chusteczka
Płuco
Choroba
Międzybłoniak opłucnej dwufazowy
Synonimy
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Dokumenty

NCI-H2452

Cell line · Numer produktu 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NCI-H2452 to ludzka linia komórkowa złośliwego międzybłoniaka opłucnej, która została uzyskana z opłucnej pacjenta z międzybłoniakiem. Jest ona często wykorzystywana w badaniach ukierunkowanych na zrozumienie patofizjologii międzybłoniaka i opracowanie nowych podejść terapeutycznych. Podobnie jak inne linie komórkowe międzybłoniaka, NCI-H2452 jest związany z narażeniem na włókna azbestu, co jest dobrze znanym czynnikiem ryzyka międzybłoniaka. Badania z udziałem NCI-H2452 podkreśliły jego przydatność w badaniu mechanizmów progresji choroby i odpowiedzi na różne terapie, w szczególności terapie genowe i wirusowe metody onkolizy.

Komórki NCI-H2452 wykazują ekspresję receptora Coxsackie i adenowirusowego (CAR) oraz CD46, co czyni je odpowiednimi kandydatami do badań nad terapią genową opartą na adenowirusach. W badaniach nad wiroterapią onkolityczną, zarówno adenowirus typu 5 (Ad5), jak i wariant zmodyfikowany włóknami (Ad5F35) zostały przetestowane na komórkach NCI-H2452. Adenowirusy te replikują się selektywnie w komórkach nowotworowych, indukując onkolizę w sposób zależny od cząsteczki wirusa. Stwierdzono, że zarówno Ad5, jak i Ad5F35 wykazywały podobną skuteczność w indukowaniu śmierci komórek w komórkach NCI-H2452, wspierając ich potencjał w terapii genowej międzybłoniaka złośliwego.

Oprócz roli w terapii wirusami onkolitycznymi, komórki NCI-H2452 zostały wykorzystane do badania angiogenezy nowotworowej, kluczowego czynnika w progresji międzybłoniaka. Komórki NCI-H2452 wykazują ekspresję progranuliny (PGRN) i białek podobnych do granuliny, które zostały zidentyfikowane jako nowe czynniki angiogenne działające niezależnie od szlaku VEGF. Ta niezależna od VEGF angiogeneza ma kluczowe znaczenie, ponieważ oferuje alternatywne cele terapeutyczne w przypadkach, gdy terapie anty-VEGF, takie jak bevacizumab, nie poprawiają wyników leczenia pacjentów. Badania wskazują, że granuliny te w znacznym stopniu przyczyniają się do tworzenia nowych naczyń krwionośnych, co wspomaga wzrost guza i może być związane z opornością na niektóre terapie.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Międzybłoniak opłucnej dwufazowy
Synonimy
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
NCI-H2452 (numer katalogowy Cytion 300391)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
Dorosły
Pochodzenie etniczne
Europejski