Skip to content
NCI-H2452
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งเยื่อหุ้มปอดชนิดสองระยะ
Synonyms
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Documents

NCI-H2452

Cell line · Product number 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ NCI-H2452 เป็นสายเซลล์มะเร็งเยื่อหุ้มปอดชนิดเมโสธีเลียมของมนุษย์ ซึ่งได้มาจากเยื่อหุ้มปอดของผู้ป่วยที่เป็นโรคเมโสธีเลียม สายเซลล์นี้ถูกนำมาใช้บ่อยในงานวิจัยที่มุ่งเน้นการทำความเข้าใจพยาธิสรีรวิทยาของโรคเมโสธีเลียมและการพัฒนาแนวทางการรักษาใหม่ๆเช่นเดียวกับเซลล์ไลน์เมโสธีเลียมชนิดอื่น ๆ NCI-H2452 มีความเกี่ยวข้องกับการสัมผัสกับเส้นใยแอสเบสตอส ซึ่งเป็นปัจจัยเสี่ยงที่ทราบกันดีสำหรับโรคเมโสธีเลียม งานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับ NCI-H2452 ได้เน้นย้ำถึงประโยชน์ของเซลล์ไลน์นี้ในการศึกษาวิถีการดำเนินโรคและการตอบสนองต่อการรักษาต่าง ๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการบำบัดด้วยยีนและวิธีการกำจัดเนื้องอกด้วยไวรัส

เซลล์ NCI-H2452 แสดงออกของตัวรับ Coxsackie และ adenovirus (CAR) และ CD46 ซึ่งทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมสำหรับการศึกษาการบำบัดด้วยยีนที่ใช้ adenovirus เป็นพื้นฐาน ในการวิจัยเกี่ยวกับ oncolytic virotherapy ทั้ง adenovirus ชนิดที่ 5 (Ad5) และ adenovirus ที่ถูกดัดแปลงด้วยไฟเบอร์ (Ad5F35) ได้ถูกทดสอบกับเซลล์ NCI-H2452 แล้วอะดีโนไวรัสเหล่านี้สามารถจำลองตัวเองได้เฉพาะในเซลล์มะเร็ง โดยกระตุ้นให้เกิดการสลายตัวของเซลล์มะเร็งในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับอนุภาคไวรัส พบว่าทั้ง Ad5 และ Ad5F35 แสดงประสิทธิภาพที่คล้ายคลึงกันในการกระตุ้นการตายของเซลล์ในเซลล์ NCI-H2452 ซึ่งสนับสนุนศักยภาพของพวกมันในการบำบัดด้วยยีนสำหรับมะเร็งเยื่อหุ้มปอดชนิดร้ายแรง

นอกเหนือจากบทบาทในการบำบัดด้วยไวรัสทำลายเนื้องอก (oncolytic virotherapy) แล้ว เซลล์ NCI-H2452 ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาการเกิดหลอดเลือดใหม่ในเนื้องอก ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญในการลุกลามของมะเร็งเยื่อหุ้มปอด (mesothelioma) เซลล์ NCI-H2452 แสดงออกของโปรแกรนูลิน (PGRN) และโปรตีนคล้ายแกรนูลิน ซึ่งได้รับการระบุว่าเป็นปัจจัยกระตุ้นการเกิดหลอดเลือดใหม่ชนิดใหม่ ที่ทำงานแยกจากเส้นทาง VEGFการสร้างหลอดเลือดใหม่ที่ไม่ขึ้นกับ VEGF นี้มีความสำคัญอย่างยิ่ง เนื่องจากเป็นเป้าหมายการรักษาทางเลือกในกรณีที่การรักษาด้วยยาต้าน VEGF เช่น bevacizumab ไม่สามารถปรับปรุงผลลัพธ์ของผู้ป่วยได้ งานวิจัยชี้ให้เห็นว่า granulins เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการสร้างหลอดเลือดใหม่ ซึ่งช่วยสนับสนุนการเจริญเติบโตของเนื้องอกและอาจเกี่ยวข้องกับการดื้อต่อยาบางชนิด

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งเยื่อหุ้มปอดชนิดสองระยะ
Synonyms
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
NCI-H2452 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300391)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ผู้ใหญ่
Ethnicity
ยุโรป