Gå til innholdet
NCI-H2452
Vev
Lunge
Sykdom
Bifasisk pleuralt mesoteliom
Synonymer
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Dokumenter

NCI-H2452

Cell line · Produktnummer 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NCI-H2452-cellelinjen er en human cellelinje for malignt pleuramesoteliom, som ble avledet fra pleura fra en pasient med mesoteliom. Den brukes ofte i forskning som fokuserer på å forstå mesoteliomets patofysiologi og utvikle nye behandlingsmetoder. I likhet med andre mesoteliomcellelinjer er NCI-H2452 forbundet med eksponering for asbestfibre, som er en veletablert risikofaktor for mesoteliom. Studier med NCI-H2452 har vist at den er velegnet til å utforske mekanismer for sykdomsprogresjon og respons på ulike behandlingsformer, særlig genterapi og viral onkolyse.

NCI-H2452-celler uttrykker Coxsackie- og adenovirusreseptor (CAR) og CD46, noe som gjør dem til egnede kandidater for adenovirusbaserte genterapistudier. I forskning på onkolytisk viroterapi har både adenovirus type 5 (Ad5) og en fibermodifisert variant (Ad5F35) blitt testet på NCI-H2452-celler. Disse adenovirusene replikerer selektivt i tumorceller, og induserer onkolyse på en viruspartikkelavhengig måte. Det viste seg at både Ad5 og Ad5F35 var like effektive når det gjaldt å indusere celledød i NCI-H2452-celler, noe som underbygger deres potensial i genterapi mot malignt mesoteliom.

I tillegg til sin rolle i onkolytisk viroterapi har NCI-H2452-celler blitt brukt til å studere tumorangiogenese, en nøkkelfaktor i utviklingen av mesoteliom. NCI-H2452 uttrykker progranulin (PGRN) og granulinlignende proteiner, som har blitt identifisert som nye angiogenetiske faktorer som virker uavhengig av VEGF-banen. Denne VEGF-uavhengige angiogenesen er avgjørende, ettersom den tilbyr alternative terapeutiske mål i tilfeller der anti-VEGF-behandlinger som bevacizumab ikke gir bedre resultater for pasienten. Forskning tyder på at disse granulinene bidrar betydelig til dannelsen av nye blodkar, noe som støtter tumorvekst og kan være involvert i resistens mot visse behandlinger.

Vev
Lunge
Sykdom
Bifasisk pleuralt mesoteliom
Synonymer
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H2452 (Cytion katalognummer 300391)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Voksen
Etnisitet
Europeisk