Ga naar de inhoud
NCI-H2452
Weefsel
Long
Ziekte
Pleuraal bifasisch mesothelioom
Synoniemen
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Documenten

NCI-H2452

Cell line · Productnummer 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De NCI-H2452 cellijn is een humane maligne pleurale mesothelioom cellijn, die is afgeleid van het borstvlies van een patiënt met mesothelioom. De lijn wordt vaak gebruikt in onderzoek dat is gericht op het begrijpen van de pathofysiologie van mesothelioom en het ontwikkelen van nieuwe therapeutische benaderingen. Net als andere mesothelioomcellijnen wordt NCI-H2452 geassocieerd met blootstelling aan asbestvezels, een bewezen risicofactor voor mesothelioom. Studies met NCI-H2452 hebben het nut ervan aangetoond bij het onderzoeken van mechanismen van ziekteprogressie en respons op verschillende therapieën, met name gentherapieën en virale oncolyse benaderingen.

NCI-H2452 cellen brengen Coxsackie en adenovirusreceptor (CAR) en CD46 tot expressie, waardoor ze geschikte kandidaten zijn voor gentherapiestudies op basis van adenovirussen. In onderzoek naar oncolytische virotherapie zijn zowel adenovirus type 5 (Ad5) als een vezelgemodificeerde variant (Ad5F35) getest op NCI-H2452-cellen. Deze adenovirussen vermenigvuldigen zich selectief binnen tumorcellen en induceren oncolyse op een virusdeeltje-afhankelijke manier. Het bleek dat zowel Ad5 als Ad5F35 een vergelijkbare werkzaamheid vertoonden bij het induceren van celdood in NCI-H2452-cellen, wat hun potentieel voor gentherapie voor maligne mesothelioom ondersteunt.

Naast de rol in oncolytische virotherapie zijn NCI-H2452 cellen gebruikt om tumorangiogenese te bestuderen, een belangrijke factor in de progressie van mesothelioom. NCI-H2452 brengt progranuline (PGRN) en granuline-achtige eiwitten tot expressie, die zijn geïdentificeerd als nieuwe angiogene factoren die onafhankelijk van de VEGF-route werken. Deze VEGF-onafhankelijke angiogenese is cruciaal, omdat het alternatieve therapeutische doelwitten biedt in gevallen waarin anti-VEGF therapieën zoals bevacizumab er niet in slagen de resultaten voor patiënten te verbeteren. Onderzoek wijst uit dat deze granulinen aanzienlijk bijdragen aan de vorming van nieuwe bloedvaten, wat de tumorgroei ondersteunt en betrokken kan zijn bij de resistentie tegen bepaalde behandelingen.

Weefsel
Long
Ziekte
Pleuraal bifasisch mesothelioom
Synoniemen
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H2452 (Cytion catalogusnummer 300391)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
Volwassen
Etnische afkomst
Europese