الانتقال إلى المحتوى
NCI-H2452
الأنسجة
الرئة
المرض
ورم الظهارة المتوسطة الجنبي ثنائي الطور الجنبي
المرادفات
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

المستندات

NCI-H2452

Cell line · رقم المنتج 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلالة الخلايا NCI-H2452 هي سلالة خلايا ورم الظهارة المتوسطة الجنبي الخبيث البشري، والتي تم اشتقاقها من غشاء الجنب لمريض مصاب بورم الظهارة المتوسطة. ويُستخدم بشكل متكرر في الأبحاث التي تركز على فهم الفيزيولوجيا المرضية لورم الظهارة المتوسطة وتطوير أساليب علاجية جديدة. وعلى غرار خطوط خلايا ورم الظهارة المتوسطة الأخرى، يرتبط NCI-H2452 بالتعرض لألياف الأسبستوس، وهو عامل خطر راسخ للإصابة بورم الظهارة المتوسطة. وقد أبرزت الدراسات التي شملت NCI-H2452 فائدتها في استكشاف آليات تطور المرض والاستجابة للعلاجات المختلفة، لا سيما العلاجات الجينية ونهج التحلل الفيروسي.

تُعبّر خلايا NCI-H2452 عن مستقبلات فيروس كوكساكي ومستقبلات الفيروس الغدي (CAR) وCD46، مما يجعلها مرشحة مناسبة لدراسات العلاج الجيني القائم على الفيروس الغدي. في الأبحاث التي تتحرى العلاج بالفيروسات الغدية من النوع 5 (Ad5) والمتغير المعدل بالألياف (Ad5F35) على خلايا NCI-H2452. تتكاثر هذه الفيروسات الغدية بشكل انتقائي داخل الخلايا الورمية، مما يؤدي إلى تحلل الخلايا بطريقة تعتمد على الجسيمات الفيروسية. وقد وُجد أن كلاً من Ad5 وAd5F35 أظهرا فعالية مماثلة في تحفيز موت الخلايا في خلايا NCI-H2452، مما يدعم إمكاناتهما في العلاج الجيني لورم الظهارة المتوسطة الخبيث.

وبالإضافة إلى دورها في العلاج بالفيروسات الخبيثة، استُخدمت خلايا NCI-H2452 لدراسة تكوّن الأوعية الدموية للورم، وهو عامل رئيسي في تطور ورم الظهارة المتوسطة. يعبّر NCI-H2452 عن بروجرانولين (PGRN) وبروتينات شبيهة بالجرانولين، والتي تم تحديدها كعوامل جديدة لتوليد الأوعية الدموية تعمل بشكل مستقل عن مسار عامل النمو الوعائي المستقل عن عامل النمو الوعائي المستقبلي. ويُعدّ هذا التوليد الوعائي المستقل عن عامل النمو الوعائي لعامل النمو الوعائي المستقل عن عامل النمو الوعائي لِعامل النمو الوعائي لِعامل النمو البشري (VEGF) أمراً بالغ الأهمية، حيث يوفر أهدافاً علاجية بديلة في الحالات التي تفشل فيها العلاجات المضادة لعامل النمو الوعائي لِعامل النمو الوعائي لِعامل النمو البشري مثل البيفاسيزوماب في تحسين نتائج المرضى. تشير الأبحاث إلى أن هذه الحبيبات تسهم بشكل كبير في تكوين أوعية دموية جديدة، مما يدعم نمو الورم وقد يكون لها دور في مقاومة بعض العلاجات.

الأنسجة
الرئة
المرض
ورم الظهارة المتوسطة الجنبي ثنائي الطور الجنبي
المرادفات
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
NCI-H2452 (رقم الكتالوج سيتيون 300391)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1553

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
للبالغين
الأصل العرقي
أوروبي

قد تحتاج أيضًا إلى