NCI-H2452

A linhagem celular NCI-H2452 é uma linhagem de células de mesotelioma pleural maligno humano, derivada da pleura de um paciente com mesotelioma. É frequentemente utilizada em pesquisas voltadas para a compreensão da fisiopatologia do mesotelioma e para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas. Assim como outras linhagens celulares de mesotelioma, a NCI-H2452 está associada à exposição a fibras de amianto, um fator de risco bem estabelecido para o mesotelioma. Estudos envolvendo a NCI-H2452 destacaram sua utilidade na exploração dos mecanismos de progressão da doença e da resposta a diversas terapias, particularmente terapias gênicas e abordagens de onólise viral.

As células NCI-H2452 expressam o receptor de Coxsackie e adenovírus (CAR) e o CD46, o que as torna candidatas adequadas para estudos de terapia gênica baseada em adenovírus. Em pesquisas que investigam a viroterapia oncolítica, tanto o adenovírus tipo 5 (Ad5) quanto uma variante modificada na fibra (Ad5F35) foram testados em células NCI-H2452. Esses adenovírus se replicam seletivamente dentro das células tumorais, induzindo a oncolise de maneira dependente das partículas virais. Verificou-se que tanto o Ad5 quanto o Ad5F35 apresentaram eficácia semelhante na indução da morte celular nas células NCI-H2452, o que corrobora seu potencial na terapia gênica para o mesotelioma maligno.

Além de seu papel na viroterapia oncolítica, as células NCI-H2452 têm sido utilizadas para estudar a angiogênese tumoral, um fator-chave na progressão do mesotelioma. As células NCI-H2452 expressam progranulina (PGRN) e proteínas semelhantes à granulina, que foram identificadas como novos fatores angiogênicos que atuam independentemente da via do VEGF. Essa angiogênese independente do VEGF é crucial, pois oferece alvos terapêuticos alternativos nos casos em que terapias anti-VEGF, como o bevacizumabe, não conseguem melhorar os resultados dos pacientes. Pesquisas indicam que essas granulinas contribuem significativamente para a formação de novos vasos sanguíneos, o que favorece o crescimento tumoral e pode estar envolvido na resistência a certos tratamentos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.