NCI-H2452
Cell line · Product number 300391
The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...
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01General information
- Description
NCI-H2452 细胞系是一种人类恶性胸膜间皮瘤细胞系,源自一名间皮瘤患者的胸膜。它常用于研究间皮瘤的病理生理学和开发新的治疗方法。与其他间皮瘤细胞系一样,NCI-H2452 也与接触石棉纤维有关,而石棉纤维是间皮瘤的一个公认风险因素。对NCI-H2452的研究突显了它在探索疾病进展机制和对各种疗法(尤其是基因疗法和病毒溶瘤疗法)的反应方面的作用。
NCI-H2452细胞表达柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)和CD46,因此适合进行基于腺病毒的基因治疗研究。在研究溶瘤病毒疗法时,已在 NCI-H2452 细胞上测试了 5 型腺病毒(Ad5)和一种纤维修饰变体(Ad5F35)。这些腺病毒在肿瘤细胞内选择性复制,以病毒颗粒依赖的方式诱导溶瘤。研究发现,Ad5 和 Ad5F35 在诱导 NCI-H2452 细胞死亡方面显示出相似的功效,这支持了它们在恶性间皮瘤基因治疗中的潜力。
除了在溶瘤病毒疗法中发挥作用外,NCI-H2452 细胞还被用于研究肿瘤血管生成,这是间皮瘤进展的一个关键因素。NCI-H2452表达原粒细胞蛋白(PGRN)和粒细胞蛋白样蛋白,这些蛋白已被确定为独立于血管内皮生长因子通路的新型血管生成因子。这种不依赖于血管内皮生长因子的血管生成至关重要,因为它为贝伐珠单抗等抗血管内皮生长因子疗法无法改善患者预后的病例提供了替代治疗靶点。研究表明,这些颗粒蛋白对新血管的形成有很大帮助,从而支持肿瘤生长,并可能与某些治疗方法的抗药性有关。
- Tissue
- 肺部
- Disease
- 胸膜双相间皮瘤
- Synonyms
- NCI-H2452
- H-2452
- NCIH2452
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
03Characteristics
- Morphology
- 上皮细胞
04Identifiers
- Citation
- NCI-H2452(Cytion 目录号 300391)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1553
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Donor age
- 成人
- Ethnicity
- 欧洲
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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