Pāriet uz saturu
NCI-H2452
Audums
Plaušas
Slimība
Pleiras bifāziskā mezotelioma
Sinonīmi
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Dokumenti

NCI-H2452

Cell line · Preces numurs 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H2452 šūnu līnija ir cilvēka ļaundabīgās pleiras mezoteliomas šūnu līnija, kas iegūta no mezoteliomas pacienta pleiras. To bieži izmanto pētījumos, kuru mērķis ir izprast mezoteliomas patofizioloģiju un izstrādāt jaunas terapeitiskās pieejas. Tāpat kā citas mezoteliomas šūnu līnijas, arī NCI-H2452 ir saistīta ar azbesta šķiedru iedarbību, kas ir vispāratzīts mezoteliomas riska faktors. Pētījumi ar NCI-H2452 ir uzsvēruši tās lietderību, pētot slimības progresēšanas mehānismus un reakciju uz dažādām terapijām, jo īpaši gēnu terapijām un vīrusu onkolīzes metodēm.

NCI-H2452 šūnas ekspresē Coxsackie un adenovīrusa receptoru (CAR) un CD46, tāpēc tās ir piemērotas kandidātes uz adenovīrusu balstītas gēnu terapijas pētījumiem. Onkolītiskās viroterapijas pētījumos ar NCI-H2452 šūnām ir pārbaudīts gan 5. tipa adenovīruss (Ad5), gan šķiedru modificēts variants (Ad5F35). Šie adenovīrusi selektīvi replicējas audzēja šūnās, izraisot onkolīzi vīrusa daļiņu atkarīgā veidā. Tika konstatēts, ka gan Ad5, gan Ad5F35 uzrāda līdzīgu efektivitāti, izraisot šūnu bojāeju NCI-H2452 šūnās, kas apstiprina to potenciālu ļaundabīgās mezoteliomas gēnu terapijā.

Papildus NCI-H2452 šūnu nozīmei onkolītiskajā viroterapijā tās tika izmantotas audzēja angiogēzes, kas ir galvenais mezoteliomas progresēšanas faktors, izpētei. NCI-H2452 ekspresē progranulīnu (PGRN) un granulīnam līdzīgus proteīnus, kas ir identificēti kā jauni angiogēnie faktori, kuri darbojas neatkarīgi no VEGF ceļa. Šī no VEGF neatkarīgā angiogeneze ir ļoti svarīga, jo tā piedāvā alternatīvus terapeitiskos mērķus gadījumos, kad anti-VEGF terapija, piemēram, bevacizumabs, nespēj uzlabot pacientu ārstēšanas rezultātus. Pētījumi liecina, ka šie granulīni būtiski veicina jaunu asinsvadu veidošanos, kas veicina audzēja augšanu un var būt saistīti ar rezistenci pret noteiktiem ārstēšanas veidiem.

Audums
Plaušas
Slimība
Pleiras bifāziskā mezotelioma
Sinonīmi
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H2452 (Cytion kataloga numurs 300391)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo
Etniskā piederība
Eiropas