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NCI-H2452
Tecido
Pulmão
Doença
Mesotelioma bifásico pleural
Sinónimos
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Documentos

NCI-H2452

Cell line · Número do produto 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular NCI-H2452 é uma linha celular de mesotelioma pleural maligno humano, que foi derivada da pleura de um doente com mesotelioma. É frequentemente utilizada em investigação centrada na compreensão da fisiopatologia do mesotelioma e no desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas. Tal como outras linhas celulares de mesotelioma, a NCI-H2452 está associada à exposição a fibras de amianto, um fator de risco bem estabelecido para o mesotelioma. Os estudos que envolvem a NCI-H2452 destacaram a sua utilidade na exploração dos mecanismos de progressão da doença e de resposta a várias terapias, nomeadamente terapias genéticas e abordagens de oncólise viral.

As células NCI-H2452 expressam o recetor de Coxsackie e adenovírus (CAR) e CD46, o que as torna candidatas adequadas para estudos de terapia genética baseados em adenovírus. Na investigação sobre a viroterapia oncolítica, tanto o adenovírus tipo 5 (Ad5) como uma variante modificada em fibra (Ad5F35) foram testados em células NCI-H2452. Estes adenovírus replicam-se seletivamente nas células tumorais, induzindo a oncólise de uma forma dependente da partícula viral. Verificou-se que tanto o Ad5 como o Ad5F35 apresentaram uma eficácia semelhante na indução da morte celular nas células NCI-H2452, apoiando o seu potencial na terapia genética do mesotelioma maligno.

Para além do seu papel na viroterapia oncolítica, as células NCI-H2452 têm sido utilizadas para estudar a angiogénese tumoral, um fator-chave na progressão do mesotelioma. As células NCI-H2452 expressam progranulina (PGRN) e proteínas semelhantes à granulina, que foram identificadas como novos factores angiogénicos que funcionam independentemente da via do VEGF. Esta angiogénese independente do VEGF é crucial, uma vez que oferece alvos terapêuticos alternativos nos casos em que as terapias anti-VEGF, como o bevacizumab, não conseguem melhorar os resultados dos doentes. A investigação indica que estas granulinas contribuem significativamente para a formação de novos vasos sanguíneos, o que apoia o crescimento do tumor e pode estar envolvido na resistência a determinados tratamentos.

Tecido
Pulmão
Doença
Mesotelioma bifásico pleural
Sinónimos
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
NCI-H2452 (número de catálogo Cytion 300391)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Adulto
Etnia
Europeu