NCI-H2452
Cell line · Product number 300391
The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...
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01General information
- Description
NCI-H2452 細胞系是一種人類惡性胸膜間皮瘤細胞系,源自一名間皮瘤患者的胸膜。該細胞系常被用於旨在了解間皮瘤病理生理學及開發新治療方法的研究中。 與其他間皮瘤細胞系一樣,NCI-H2452 與石棉纖維暴露有關,而石棉纖維是間皮瘤已確立的風險因子。涉及 NCI-H2452 的研究已凸顯其在探索疾病進展機制及對各種療法(尤其是基因療法和病毒溶瘤療法)反應方面的實用價值。
NCI-H2452 細胞表達柯薩奇病毒與腺病毒受體(CAR)及 CD46,使其成為基於腺病毒的基因治療研究的理想候選細胞系。 在研究溶瘤病毒療法時,已分別在 NCI-H2452 細胞上測試了第 5 型腺病毒(Ad5)及其纖維修飾變體(Ad5F35)。 這些腺病毒會在腫瘤細胞內選擇性地複製,並以病毒顆粒依賴性方式誘導腫瘤溶解。研究發現,Ad5 和 Ad5F35 在誘導 NCI-H2452 細胞死亡方面均展現出相似的療效,這支持了它們在惡性間皮瘤基因療法中的潛力。
除了在溶瘤病毒療法中的作用外,NCI-H2452 細胞還被用於研究腫瘤血管生成,這是間皮瘤進展的關鍵因素。 NCI-H2452 會表達前顆粒蛋白(PGRN)及顆粒蛋白樣蛋白,這些已被鑑定為獨立於 VEGF 途徑運作的新型血管生成因子。 這種獨立於VEGF的血管生成至關重要,因為當貝伐珠單抗等抗VEGF療法無法改善患者預後時,它提供了替代的治療靶點。研究表明,這些顆粒蛋白顯著促進了新血管的形成,這不僅助長了腫瘤生長,還可能與對某些治療的耐藥性有關。
- Tissue
- 肺
- Disease
- 胸膜雙相間皮瘤
- Synonyms
- NCI-H2452
- H-2452
- NCIH2452
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
03Characteristics
- Morphology
- 上皮性
04Identifiers
- Citation
- NCI-H2452(Cytion 型號 300391)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1553
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 成人
- Ethnicity
- 歐洲的
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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