Mine otse sisu juurde
NCI-H2452
Kude
Kopsud
Haigus
Pleura kahefaasiline mesotelioom
Sünonüümid
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Dokumendid

NCI-H2452

Cell line · Toote number 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H2452 rakuliin on inimese pahaloomulise pleura mesotelioomi rakuliin, mis on saadud mesotelioomiga patsiendi pleura rakust. Seda kasutatakse sageli teadusuuringutes, mis keskenduvad mesotelioomi patofüsioloogia mõistmisele ja uute ravimeetodite väljatöötamisele. Nagu teised mesotelioomi rakuliinid, on ka NCI-H2452 seotud kokkupuutega asbestikiududega, mis on mesotelioomi väljakujunenud riskitegur. NCI-H2452-ga tehtud uuringud on rõhutanud selle kasulikkust haiguse progresseerumise ja erinevate ravimeetodite, eelkõige geeniteraapia ja viirusliku onkolüüsi mehhanismide uurimisel.

NCI-H2452 rakud ekspresseerivad Coxsackie ja adenoviiruse retseptorit (CAR) ja CD46, mis muudab nad sobivaks kandidaadiks adenoviirusel põhinevateks geeniteraapia uuringuteks. Onkolüütilist viroteraapiat uurides on NCI-H2452 rakkudel katsetatud nii adenoviiruse tüüp 5 (Ad5) kui ka kiudmoodustatud varianti (Ad5F35). Need adenoviirused paljunevad selektiivselt kasvajarakkudes, indutseerides onkolüüsi viirusosakestest sõltuval viisil. Leiti, et nii Ad5 kui ka Ad5F35 on NCI-H2452 rakkudes rakusurma esilekutsumisel sarnase tõhususega, mis toetab nende potentsiaali geeniteraapias pahaloomulise mesotelioomi puhul.

Lisaks rollile onkolüütilises viroteraapias on NCI-H2452 rakke kasutatud ka kasvajate angiogeneesi uurimiseks, mis on mesotelioomi progresseerumise võtmetegur. NCI-H2452 ekspresseerib progranuliini (PGRN) ja granuliinilaadseid valke, mis on tuvastatud kui uued angiogeensed faktorid, mis toimivad VEGF-radast sõltumatult. Selline VEGF-ist sõltumatu angiogenees on ülioluline, sest see pakub alternatiivseid terapeutilisi sihtmärke juhtudel, kui VEGF-vastased ravimeetodid, nagu bevatsizumab, ei paranda patsientide tulemusi. Uuringud näitavad, et need granuliinid aitavad oluliselt kaasa uute veresoonte moodustumisele, mis toetab kasvaja kasvu ja võib olla seotud resistentsusega teatud ravimeetodite suhtes.

Kude
Kopsud
Haigus
Pleura kahefaasiline mesotelioom
Sünonüümid
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
NCI-H2452 (Cytioni katalooginumber 300391)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud
Etniline kuuluvus
Euroopa