Pereiti prie turinio
NCI-H2452
Audinys
Plaučiai
Liga
Pleuros bifazinė mezotelioma
Sinonimai
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Dokumentai

NCI-H2452

Cell line · Prekės numeris 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NCI-H2452 ląstelių linija yra žmogaus piktybinės pleuros mezoteliomos ląstelių linija, gauta iš mezotelioma sergančio paciento pleuros. Ji dažnai naudojama moksliniuose tyrimuose, skirtuose mezoteliomos patofiziologijai suprasti ir naujiems gydymo metodams kurti. Kaip ir kitos mezoteliomos ląstelių linijos, NCI-H2452 yra susijusi su asbesto pluošto poveikiu, kuris yra gerai žinomas mezoteliomos rizikos veiksnys. Tyrimai su NCI-H2452 išryškino jos naudingumą tiriant ligos progresavimo mechanizmus ir atsaką į įvairius gydymo būdus, ypač genų terapiją ir virusinės onkolizės metodus.

NCI-H2452 ląstelės ekspresuoja Coxsackie ir adenoviruso receptorių (CAR) ir CD46, todėl jos yra tinkamos kandidatės adenovirusu pagrįstos genų terapijos tyrimams. Atliekant onkolitinės virusoterapijos tyrimus, su NCI-H2452 ląstelėmis buvo išbandytas 5 tipo adenovirusas (Ad5) ir jo pluoštu modifikuotas variantas (Ad5F35). Šie adenovirusai selektyviai replikuojasi naviko ląstelėse, sukeldami nuo viruso dalelių priklausomą onkolizę. Nustatyta, kad tiek Ad5, tiek Ad5F35 pasižymėjo panašiu veiksmingumu sukeldami ląstelių mirtį NCI-H2452 ląstelėse, o tai patvirtina jų potencialą taikant genų terapiją piktybinei mezoteliomai gydyti.

NCI-H2452 ląstelės buvo naudojamos ne tik onkolitinei virusoterapijai, bet ir naviko angiogenezei, kuri yra pagrindinis mezoteliomos progresavimo veiksnys, tirti. NCI-H2452 ekspresuoja progranuliną (PGRN) ir į granuliną panašius baltymus, kurie nustatyti kaip nauji angiogeniniai veiksniai, veikiantys nepriklausomai nuo VEGF kelio. Nuo VEGF nepriklausoma angiogenezė yra labai svarbi, nes ji yra alternatyvus terapinis taikinys tais atvejais, kai anti-VEGF terapija, pavyzdžiui, bevacizumabas, nepadeda pagerinti pacientų gydymo rezultatų. Tyrimai rodo, kad šie granulinai labai prisideda prie naujų kraujagyslių formavimosi, kuris palaiko naviko augimą ir gali būti susijęs su atsparumu tam tikriems gydymo būdams.

Audinys
Plaučiai
Liga
Pleuros bifazinė mezotelioma
Sinonimai
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
NCI-H2452 (Cytion katalogo numeris 300391)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Suaugusiųjų
Etninė priklausomybė
Europos