Siirry sisältöön
NCI-H2452
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pleuran kaksivaiheinen mesoteliooma
Synonyymit
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

Asiakirjat

NCI-H2452

Cell line · Tuotenumero 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H2452-solulinja on ihmisen pahanlaatuinen keuhkopussin mesotelioomasolulinja, joka on peräisin mesotelioomapotilaan keuhkopussista. Sitä käytetään usein tutkimuksessa, jossa keskitytään mesoteliooman patofysiologian ymmärtämiseen ja uusien terapeuttisten lähestymistapojen kehittämiseen. Muiden mesotelioomasolulinjojen tavoin NCI-H2452 liittyy altistumiseen asbestikuiduille, joka on mesoteliooman vakiintunut riskitekijä. NCI-H2452:lla tehdyissä tutkimuksissa on korostettu sen hyödyllisyyttä taudin etenemismekanismien ja vasteen tutkimisessa erilaisille hoidoille, erityisesti geeniterapioille ja virusonkolyysi-menetelmille.

NCI-H2452-solut ilmentävät Coxsackie- ja adenovirusreseptoria (CAR) ja CD46:ta, mikä tekee niistä sopivia ehdokkaita adenoviruspohjaisiin geeniterapiatutkimuksiin. Onkolyyttistä viroterapiaa tutkivissa tutkimuksissa NCI-H2452-soluilla on testattu sekä adenovirus tyyppi 5:tä (Ad5) että kuitumodifioidun muunnoksen (Ad5F35). Nämä adenovirukset lisääntyvät valikoivasti kasvainsoluissa ja indusoivat onkolyysiä virushiukkasista riippuvaisella tavalla. Todettiin, että sekä Ad5 että Ad5F35 osoittivat samanlaista tehokkuutta solukuoleman indusoimisessa NCI-H2452-soluissa, mikä tukee niiden potentiaalia pahanlaatuisen mesoteliooman geeniterapiassa.

Sen lisäksi, että NCI-H2452-soluja on käytetty onkolyyttisessä viroterapiassa, niitä on käytetty kasvaimen angiogeneesin tutkimiseen, joka on keskeinen tekijä mesoteliooman etenemisessä. NCI-H2452 ilmentää progranuliinia (PGRN) ja granuliinin kaltaisia proteiineja, jotka on tunnistettu uusiksi angiogeenisiksi tekijöiksi, jotka toimivat VEGF-reitistä riippumatta. Tämä VEGF:stä riippumaton angiogeneesi on ratkaisevan tärkeää, koska se tarjoaa vaihtoehtoisia hoitokohteita tapauksissa, joissa VEGF:n vastaiset hoidot, kuten bevasitsumabi, eivät paranna potilaiden tuloksia. Tutkimukset osoittavat, että nämä granuliinit edistävät merkittävästi uusien verisuonten muodostumista, mikä tukee kasvaimen kasvua ja saattaa olla osallisena vastustuskyvyssä tietyille hoidoille.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Pleuran kaksivaiheinen mesoteliooma
Synonyymit
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H2452 (Cytionin luettelonumero 300391)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset
Etnisyys
Eurooppalainen