İçeriğe atla
NCI-H2452
Doku
Akciğer
Hastalık
Plevral bifazik mezotelyoma
Eş anlamlılar
NCI-H2452, H-2452, NCIH2452

NCI-H2452

Cell line · Ürün numarası 300391

The NCI-H2452 cell line is a human malignant pleural mesothelioma cell line, which was derived from the pleura of a patient with mesothelioma. It is frequ...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H2452 hücre hattı, mezotelyomalı bir hastanın plevrasından elde edilen bir insan malign plevral mezotelyoma hücre hattıdır. Mezotelyoma patofizyolojisini anlamaya ve yeni terapötik yaklaşımlar geliştirmeye odaklanan araştırmalarda sıklıkla kullanılmaktadır. Diğer mezotelyoma hücre hatları gibi NCI-H2452 de mezotelyoma için iyi bilinen bir risk faktörü olan asbest liflerine maruz kalma ile ilişkilidir. NCI-H2452'yi içeren çalışmalar, hastalığın ilerleme mekanizmalarını ve çeşitli tedavilere, özellikle de gen terapileri ve viral onkoliz yaklaşımlarına yanıtı keşfetmedeki faydasını vurgulamıştır.

NCI-H2452 hücreleri Coxsackie ve adenovirüs reseptörünü (CAR) ve CD46'yı ifade eder, bu da onları adenovirüs tabanlı gen terapisi çalışmaları için uygun adaylar haline getirir. Onkolitik viroterapiyi araştıran çalışmalarda, hem adenovirüs tip 5 (Ad5) hem de fiber modifiye edilmiş bir varyant (Ad5F35) NCI-H2452 hücreleri üzerinde test edilmiştir. Bu adenovirüsler tümör hücreleri içinde seçici olarak çoğalmakta ve viral partiküle bağlı bir şekilde onkolizi indüklemektedir. Hem Ad5 hem de Ad5F35'in NCI-H2452 hücrelerinde hücre ölümünü indüklemede benzer etkinlik gösterdiği ve malign mezotelyoma için gen terapisindeki potansiyellerini desteklediği bulunmuştur.

Onkolitik viroterapideki rolüne ek olarak, NCI-H2452 hücreleri mezotelyoma ilerlemesinde önemli bir faktör olan tümör anjiyogenezini incelemek için kullanılmıştır. NCI-H2452, VEGF yolundan bağımsız olarak çalışan yeni anjiyojenik faktörler olarak tanımlanan progranulin (PGRN) ve granulin benzeri proteinleri ifade eder. Bu VEGF'den bağımsız anjiyogenez, bevacizumab gibi anti-VEGF tedavilerinin hasta sonuçlarını iyileştirmede başarısız olduğu durumlarda alternatif terapötik hedefler sunduğu için çok önemlidir. Araştırmalar, bu granülinlerin tümör büyümesini destekleyen yeni kan damarlarının oluşumuna önemli ölçüde katkıda bulunduğunu ve bazı tedavilere karşı dirençte rol oynayabileceğini göstermektedir.

Doku
Akciğer
Hastalık
Plevral bifazik mezotelyoma
Eş anlamlılar
  • NCI-H2452
  • H-2452
  • NCIH2452

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H2452 (Cytion katalog numarası 300391)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1553

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yetişkin
Etnik köken
Avrupa