RLE-6TN

La lignée cellulaire RLE-6TN est une lignée immortalisée de cellules épithéliales alvéolaires de type II provenant de rats adultes Fischer 344. RLE-6TN a été créée par immortalisation spontanée lors de tentatives d'introduction du gène de l'antigène SV40-T dans des cellules épithéliales alvéolaires primaires de type II. Contrairement à son homologue RLE-6T, qui a été transfecté positivement avec l'antigène SV40-T, les cellules RLE-6TN n'expriment pas le gène de l'antigène T. Malgré cela, les cellules RLE-6TN n'expriment pas le gène de l'antigène T. Malgré cela, les cellules RLE-6TN conservent des caractéristiques morphologiques et fonctionnelles essentielles des cellules alvéolaires de type II, notamment l'expression de la cytokératine et la présence de corps d'inclusion lamellaires contenant des lipides.

Les cellules RLE-6TN ont été largement utilisées comme modèle in vitro pour étudier la biologie des cellules épithéliales pulmonaires, la fonction alvéolaire et les réponses à divers stimuli physiologiques et pathologiques. Elles sont particulièrement pertinentes pour étudier la régulation et l'activité de la Na-K-ATPase dans les cellules épithéliales alvéolaires. La Na-K-ATPase est essentielle au maintien des gradients ioniques cellulaires et au transport ionique transépithélial, des processus indispensables à l'élimination du liquide alvéolaire dans les poumons. Des études ont montré que l'hormone thyroïdienne (T3) stimule l'activité de la Na-K-ATPase dans les cellules RLE-6TN en augmentant sa translocation vers la membrane plasmique plutôt qu'en augmentant sa transcription, ce qui met en évidence un nouveau mécanisme de régulation rapide.

Les cellules RLE-6TN présentent une croissance stable, avec une stabilité du caryotype quasi diploïde, et ne sont pas tumorigènes chez la souris nude. Elles présentent une activité phosphatase alcaline négative, mais une coloration positive pour les cytokératines 8, 18 et 19, ce qui confirme leur origine épithéliale. Les cellules RLE-6TN peuvent être maintenues en culture à long terme et constituent une plate-forme fiable pour les études mécanistiques sur la réparation de l'épithélium alvéolaire, le métabolisme du surfactant et les réponses cellulaires aux lésions pulmonaires, aux toxines et aux agents thérapeutiques.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie