RLE-6TN

Buněčná linie RLE-6TN je imortalizovaná linie alveolárních epiteliálních buněk potkana typu II odvozená z dospělých potkanů Fischer 344. RLE-6TN vznikla spontánní imortalizací při pokusech o zavedení genu pro antigen SV40-T do primárních alveolárních epiteliálních buněk typu II. Na rozdíl od svého protějšku RLE-6T, který byl pozitivně transfekován antigenem SV40-T, buňky RLE-6TN neexprimují gen T-antigenu. Přesto si buňky RLE-6TN zachovávají kritické morfologické a funkční znaky charakteristické pro alveolární buňky typu II, včetně exprese cytokeratinu a přítomnosti lamelárních inkluzních tělísek obsahujících lipidy.

Buňky RLE-6TN byly široce používány jako in vitro model pro zkoumání biologie plicních epiteliálních buněk, alveolární funkce a reakcí na různé fyziologické a patologické podněty. Jsou zvláště důležité pro studium regulace a aktivity Na-K-ATPázy v alveolárních epiteliálních buňkách. Na-K-ATPáza je nezbytná pro udržování buněčných iontových gradientů a trans-epiteliální transport iontů, což jsou procesy, které jsou rozhodující pro clearance alveolární tekutiny v plicích. Ve studiích bylo prokázáno, že hormon štítné žlázy (T3) stimuluje aktivitu Na-K-ATPasy v buňkách RLE-6TN spíše zvýšením její translokace do plazmatické membrány než zvýšením její transkripce, což poukazuje na nový, rychlý regulační mechanismus.

Buňky RLE-6TN vykazují stabilní růst s téměř diploidním karyotypem a nejsou tumorigenní u nahých myší. Jsou negativní na aktivitu alkalické fosfatázy, ale pozitivně se barví na cytokeratiny 8, 18 a 19, což potvrzuje jejich epiteliální původ. Buňky RLE-6TN lze dlouhodobě udržovat v kultuře a slouží jako spolehlivá platforma pro mechanistické studie obnovy alveolárního epitelu, metabolismu surfaktantu a buněčných reakcí na poškození plic, toxiny a terapeutické látky.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení