RLE-6TN

RLE-6TN-solulinja on aikuisista Fischer 344 -rotista peräisin oleva kuolematon rotan alveolaarinen tyypin II epiteelisolulinja. RLE-6TN syntyi spontaanin kuolemattomuuden kautta, kun SV40-T-antigeenigeeniä yritettiin tuoda primaarisiin alveolaarisiin tyypin II epiteelisoluihin. Toisin kuin sen vastine RLE-6T, joka transfektoitiin positiivisesti SV40-T-antigeenillä, RLE-6TN-solut eivät ilmentäisi T-antigeenigeeniä. Tästä huolimatta RLE-6TN-solut säilyttävät alveolaarisille tyypin II soluille ominaiset kriittiset morfologiset ja toiminnalliset piirteet, kuten sytokeratiinin ilmentymisen ja lipidiä sisältävien lamellulaaristen inkluusiokappaleiden esiintymisen.

RLE-6TN-soluja on käytetty laajalti in vitro -mallina keuhkoepiteelisolujen biologian, alveolien toiminnan ja erilaisiin fysiologisiin ja patologisiin ärsykkeisiin reagoimisen tutkimiseen. Ne ovat erityisen tärkeitä tutkittaessa Na-K-ATPaasin säätelyä ja aktiivisuutta alveoliepiteelisoluissa. Na-K-ATPaasi on välttämätön solujen ionigradienttien ylläpitämisessä ja trans-epiteeliaalisessa ionikuljetuksessa, jotka ovat kriittisiä prosesseja keuhkojen alveolaarisen nesteen puhdistumisen kannalta. Tutkimuksissa on osoitettu, että kilpirauhashormoni (T3) stimuloi Na-K-ATPaasin aktiivisuutta RLE-6TN-soluissa pikemminkin lisäämällä sen translokaatiota plasmakalvoon kuin lisäämällä sen transkriptiota, mikä osoittaa uudenlaisen, nopean sääntelymekanismin.

RLE-6TN-solut kasvavat vakaasti, niiden karyotyyppi on lähes diploidinen, eivätkä ne ole nude-hiirillä kasvaimia aiheuttavia. Ne ovat negatiivisia alkalisen fosfataasiaktiivisuuden suhteen, mutta värjäytyvät positiivisesti sytokeratiinien 8, 18 ja 19 suhteen, mikä vahvistaa niiden epiteeliperäisyyden. RLE-6TN-soluja voidaan ylläpitää pitkäaikaisessa viljelyssä, ja ne toimivat luotettavana alustana alveoliepiteelin korjautumista, surfaktantin aineenvaihduntaa ja solujen vasteita keuhkovaurioihin, toksiineihin ja terapeuttisiin aineisiin koskevissa mekanistisissa tutkimuksissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa