RLE-6TN

Die RLE-6TN-Zelllinie ist eine immortalisierte alveoläre Epithelzelllinie vom Typ II der Ratte, die von erwachsenen Fischer-344-Ratten stammt. RLE-6TN entstand durch spontane Immortalisierung bei Versuchen, das SV40-T-Antigen-Gen in primäre alveoläre Epithelzellen vom Typ II einzuführen. Im Gegensatz zu ihrem Gegenstück RLE-6T, das mit dem SV40-T-Antigen positiv transfiziert wurde, exprimieren die RLE-6TN-Zellen das T-Antigen-Gen nicht. Trotzdem weisen RLE-6TN-Zellen wichtige morphologische und funktionelle Merkmale auf, die für alveoläre Typ-II-Zellen charakteristisch sind, darunter die Expression von Zytokeratin und das Vorhandensein von lipidhaltigen lamellaren Einschlusskörpern.

RLE-6TN-Zellen werden häufig als In-vitro-Modell für die Untersuchung der Biologie von Lungenepithelzellen, der Alveolarfunktion und der Reaktionen auf verschiedene physiologische und pathologische Stimuli verwendet. Sie sind besonders wichtig für die Untersuchung der Regulierung und Aktivität der Na-K-ATPase in alveolären Epithelzellen. Die Na-K-ATPase ist für die Aufrechterhaltung der zellulären Ionengradienten und des trans-epithelialen Ionentransports unerlässlich, Prozesse, die für die alveoläre Flüssigkeitsausscheidung in der Lunge entscheidend sind. In Studien wurde gezeigt, dass Schilddrüsenhormone (T3) die Aktivität der Na-K-ATPase in RLE-6TN-Zellen stimulieren, indem sie ihre Translokation zur Plasmamembran fördern, anstatt ihre Transkription zu erhöhen, was auf einen neuartigen, schnellen Regulationsmechanismus hinweist.

RLE-6TN-Zellen zeigen ein stabiles Wachstum mit nahezu diploider Karyotypstabilität und sind in Nacktmäusen nicht tumorigen. Sie sind negativ für alkalische Phosphatase-Aktivität, färben aber positiv für die Cytokeratine 8, 18 und 19, was ihren epithelialen Ursprung bestätigt. RLE-6TN-Zellen können langfristig in Kultur gehalten werden und dienen als zuverlässige Plattform für mechanistische Studien zur Reparatur des Alveolarepithels, zum Surfactant-Stoffwechsel und zu zellulären Reaktionen auf Lungenverletzungen, Toxine und therapeutische Wirkstoffe.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung