RLE-6TN

RLE-6TN-cellelinjen er en udødeliggjort alveolær type II-epitelcellelinje fra rotter, avledet fra voksne Fischer 344-rotter. RLE-6TN ble etablert gjennom spontan udødeliggjøring under forsøk på å introdusere SV40-T-antigengenet i primære alveolære type II-epitelceller. I motsetning til motstykket RLE-6T, som var positivt transfektert med SV40-T-antigenet, uttrykker ikke RLE-6TN-cellene T-antigengenet. Til tross for dette beholder RLE-6TN-celler kritiske morfologiske og funksjonelle trekk som er karakteristiske for alveolære type II-celler, inkludert cytokeratinuttrykk og tilstedeværelsen av lipidholdige lamellære inklusjonslegemer.

RLE-6TN-celler har blitt mye brukt som in vitro-modell for å undersøke lungeepitelcellenes biologi, alveolær funksjon og respons på ulike fysiologiske og patologiske stimuli. De er spesielt relevante for å studere Na-K-ATPase-regulering og -aktivitet i alveolære epitelceller. Na-K-ATPase er viktig for å opprettholde cellulære ionegradienter og trans-epitelial ionetransport, prosesser som er avgjørende for alveolær væskeutskillelse i lungene. I studier har det vist seg at skjoldbruskkjertelhormon (T3) stimulerer Na-K-ATPase-aktiviteten i RLE-6TN-celler ved å øke translokasjonen til plasmamembranen i stedet for å øke transkripsjonen, noe som tyder på en ny, rask reguleringsmekanisme.

RLE-6TN-celler viser stabil vekst, med tilnærmet diploid karyotypestabilitet, og er ikke tumorigeniske i nakne mus. De er negative med hensyn til alkalisk fosfataseaktivitet, men farges positive for cytokeratin 8, 18 og 19, noe som bekrefter deres epiteliale opprinnelse. RLE-6TN-celler kan holdes i kultur over lang tid og fungerer som en pålitelig plattform for mekanistiske studier av reparasjon av alveolærepitel, surfaktantmetabolisme og cellulære responser på lungeskade, giftstoffer og terapeutiske midler.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring