RLE-6TN

RLE-6TN-cellinjen är en odödliggjord alveolär typ II-epitelcellinje från råtta som härrör från vuxna Fischer 344-råttor. RLE-6TN etablerades genom spontan immortalisering under försök att introducera SV40-T-antigengenen i primära alveolära typ II-epitelceller. Till skillnad från sin motsvarighet RLE-6T, som var positivt transfekterad med SV40-T-antigenet, uttrycker RLE-6TN-cellerna inte T-antigengenen. Trots detta bibehåller RLE-6TN-cellerna kritiska morfologiska och funktionella egenskaper som är karakteristiska för alveolära typ II-celler, inklusive cytokeratinuttryck och förekomsten av lipidinnehållande lamellära inklusionskroppar.

RLE-6TN-celler har använts i stor utsträckning som en in vitro-modell för att undersöka lungepitelcellers biologi, alveolär funktion och svar på olika fysiologiska och patologiska stimuli. De är särskilt relevanta för att studera Na-K-ATPas reglering och aktivitet i alveolära epitelceller. Na-K-ATPas är viktigt för att upprätthålla cellulära jongradienter och trans-epitelial jontransport, processer som är kritiska för alveolär vätskeklarering i lungorna. I studier har sköldkörtelhormon (T3) visat sig stimulera Na-K-ATPas-aktiviteten i RLE-6TN-celler genom att öka dess translokation till plasmamembranet snarare än att öka dess transkription, vilket belyser en ny, snabb regleringsmekanism.

RLE-6TN-cellerna uppvisar stabil tillväxt, med nästan diploid karyotypstabilitet, och är inte tumörframkallande i nakna möss. De är negativa för alkalisk fosfatasaktivitet men färgas positiva för cytokeratinerna 8, 18 och 19, vilket bekräftar deras epiteliala ursprung. RLE-6TN-celler kan långtidsodlas och utgör en tillförlitlig plattform för mekanistiska studier av reparation av alveolepitel, metabolism av surfaktant och cellulära reaktioner på lungskador, toxiner och terapeutiska medel.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring