Langsung ke isi
RLE-6TN
Tisu
Paru-paru
Sinonim
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative

RLE-6TN

Cell line · Nomor produk 305350

The RLE-6TN cell line is an immortalized rat alveolar type II epithelial cell line derived from adult Fischer 344 rats. RLE-6TN was established through sp...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel RLE-6TN adalah garis sel epitel tipe II alveolar tikus yang diawetkan yang berasal dari tikus Fischer 344 dewasa. RLE-6TN dibuat melalui imortalisasi spontan selama upaya untuk memperkenalkan gen antigen SV40-T ke dalam sel epitel tipe II alveolar primer. Tidak seperti mitranya RLE-6T, yang secara positif ditransfeksi dengan antigen SV40-T, sel RLE-6TN tidak mengekspresikan gen antigen T. Meskipun demikian, sel RLE-6TN mempertahankan ciri-ciri morfologi dan fungsional yang penting yang merupakan karakteristik sel alveolar tipe II, termasuk ekspresi sitokeratin dan adanya badan inklusi lamelar yang mengandung lipid.

Sel RLE-6TN telah banyak digunakan sebagai model in vitro untuk menyelidiki biologi sel epitel paru-paru, fungsi alveolar, dan respons terhadap berbagai rangsangan fisiologis dan patologis. Sel ini sangat relevan untuk mempelajari regulasi dan aktivitas Na-K-ATPase dalam sel epitel alveolar. Na-K-ATPase sangat penting untuk mempertahankan gradien ion seluler dan transpor ion trans-epitel, proses yang sangat penting untuk pembersihan cairan alveolar di paru-paru. Dalam penelitian, hormon tiroid (T3) telah terbukti menstimulasi aktivitas Na-K-ATPase dalam sel RLE-6TN dengan meningkatkan translokasi ke membran plasma daripada meningkatkan transkripsinya, yang menyoroti mekanisme regulasi baru yang cepat.

Sel RLE-6TN menunjukkan pertumbuhan yang stabil, dengan stabilitas kariotipe yang mendekati diploid, dan tidak bersifat tumorigenik pada tikus telanjang. Mereka negatif untuk aktivitas alkali fosfatase tetapi pewarnaan positif untuk sitokeratin 8, 18, dan 19, yang mengkonfirmasi asal epitel mereka. Sel RLE-6TN dapat dipertahankan dalam jangka panjang dalam kultur dan berfungsi sebagai platform yang dapat diandalkan untuk studi mekanistik tentang perbaikan epitel alveolar, metabolisme surfaktan, dan respons seluler terhadap cedera paru-paru, racun, dan agen terapeutik.

Tisu
Paru-paru
Sinonim
  • Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel
Tumorigenik
Tidak, Tidak bersifat tumorogenik pada tikus telanjang
Kariotipe
Sel dilaporkan tetap mendekati diploid dan secara kariotipik stabil dari bagian 19-70 dengan 50% atau lebih dari sel yang mengandung 42 kromosom. Pada bagian 37, terjadi translokasi antara kromosom 1 dan 15 yang menghasilkan trisomi lengan q kromosom 1.

04Pengidentifikasi

Referensi
RLE-6TN (Nomor katalog Cytion 305350)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4693

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
Sitokeratin 8; sitokeratin 19
Virus
SV40

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 5% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
56 hari