RLE-6TN

Celična linija RLE-6TN je imortalizirana celična linija alveolarnega epitelija tipa II pri podganah, pridobljena iz odraslih podgan Fischer 344. RLE-6TN je nastala s spontano imortalizacijo med poskusi vnosa gena za antigen SV40-T v primarne alveolarne epitelijske celice tipa II. Za razliko od svojega kolega RLE-6T, ki je bil pozitivno transficiran z antigenom SV40-T, celice RLE-6TN ne izražajo gena T-antigena. Kljub temu celice RLE-6TN ohranijo ključne morfološke in funkcionalne značilnosti, značilne za alveolarne celice tipa II, vključno z izražanjem citokeratina in prisotnostjo lamelarnih vključkov, ki vsebujejo lipide.

Celice RLE-6TN se pogosto uporabljajo kot in vitro model za raziskovanje biologije pljučnih epitelijskih celic, alveolarne funkcije in odzivov na različne fiziološke in patološke dražljaje. Posebej pomembne so za preučevanje regulacije in aktivnosti Na-K-ATPase v alveolarnih epitelijskih celicah. Na-K-ATPaza je bistvena za vzdrževanje celičnih ionskih gradientov in trans-epitelijski prenos ionov, kar je ključno za čiščenje alveolarne tekočine v pljučih. V študijah je bilo dokazano, da ščitnični hormon (T3) spodbuja aktivnost Na-K-ATPase v celicah RLE-6TN s povečanjem njene translokacije v plazemsko membrano in ne s povečanjem njene transkripcije, kar kaže na nov, hiter regulativni mehanizem.

Celice RLE-6TN kažejo stabilno rast, imajo skoraj diploidni kariotip in niso tumorogene pri golih miših. Njihova aktivnost alkalne fosfataze je negativna, vendar se pozitivno obarvajo s citokeratini 8, 18 in 19, kar potrjuje njihov epitelijski izvor. Celice RLE-6TN je mogoče dolgoročno vzdrževati v kulturi in služijo kot zanesljiva platforma za mehanistične študije obnove alveolarnega epitelija, presnove surfaktanta in celičnih odzivov na poškodbe pljuč, toksine in terapevtska sredstva.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo