RLE-6TN

La línea celular RLE-6TN es una línea de células epiteliales alveolares de tipo II de rata inmortalizadas, derivadas de ratas Fischer 344 adultas. La línea RLE-6TN se estableció mediante inmortalización espontánea durante los intentos de introducir el gen del antígeno T del SV40 en células epiteliales alveolares de tipo II primarias. A diferencia de su contraparte RLE-6T, que fue transfectada positivamente con el antígeno T del SV40, las células RLE-6TN no expresan el gen del antígeno T. A pesar de ello, las células RLE-6TN conservan características morfológicas y funcionales fundamentales propias de las células epiteliales alveolares de tipo II, entre ellas la expresión de citoqueratina y la presencia de cuerpos de inclusión lamelares que contienen lípidos.

Las células RLE-6TN se han utilizado ampliamente como modelo in vitro para investigar la biología de las células epiteliales pulmonares, la función alveolar y las respuestas a diversos estímulos fisiológicos y patológicos. Son particularmente relevantes para estudiar la regulación y la actividad de la Na-K-ATPasa en las células epiteliales alveolares. La Na-K-ATPasa es esencial para mantener los gradientes iónicos celulares y el transporte trans-epitelial de iones, procesos críticos para la eliminación del líquido alveolar en los pulmones. En diversos estudios, se ha demostrado que la hormona tiroidea (T3) estimula la actividad de la Na-K-ATPasa en las células RLE-6TN al potenciar su translocación a la membrana plasmática, en lugar de aumentar su transcripción, lo que pone de relieve un mecanismo regulador nuevo y rápido.

Las células RLE-6TN muestran un crecimiento estable, con estabilidad cariotípica casi diploide, y no son tumorigénicas en ratones desnudos. Son negativas para la actividad de la fosfatasa alcalina, pero se tiñen positivamente para las citoqueratinas 8, 18 y 19, lo que confirma su origen epitelial. Las células RLE-6TN pueden mantenerse a largo plazo en cultivo y sirven como una plataforma confiable para estudios mecanísticos sobre la reparación del epitelio alveolar, el metabolismo del surfactante y las respuestas celulares a la lesión pulmonar, las toxinas y los agentes terapéuticos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.