RLE-6TN

RLE-6TN細胞株は、成体Fischer 344ラット由来の不死化ラット肺胞II型上皮細胞株である。RLE-6TNは、初代肺胞II型上皮細胞にSV40-T抗原遺伝子を導入しようとした際に、自然発生的に不死化して樹立された。SV40-T抗原を積極的に導入したRLE-6Tとは異なり、RLE-6TN細胞はT抗原遺伝子を発現していない。にもかかわらず、RLE-6TN細胞は、サイトケラチンの発現や脂質を含むラメラ封入体の存在など、肺胞II型細胞に特徴的な重要な形態学的・機能的特徴を保持している。

RLE-6TN細胞は、肺上皮細胞の生物学、肺胞機能、様々な生理的および病理学的刺激に対する応答を研究するためのin vitroモデルとして広く用いられてきた。特に肺胞上皮細胞におけるNa-K-ATPaseの制御と活性を研究するのに適している。Na-K-ATPaseは細胞のイオン勾配を維持し、肺胞の体液クリアランスに重要なプロセスである上皮を介したイオン輸送に不可欠である。研究では、甲状腺ホルモン（T3）がRLE-6TN細胞のNa-K-ATPアーゼ活性を、その転写を増加させるのではなく、細胞膜への転位を促進することによって刺激することが示されており、新規で迅速な制御メカニズムが強調されている。

RLE-6TN細胞は安定した増殖を示し、核型はほぼ2倍体であり、ヌードマウスでは腫瘍化しない。アルカリホスファターゼ活性は陰性であるが、サイトケラチン8、18、19は陽性であり、上皮由来であることが確認された。RLE-6TN細胞は長期培養維持が可能であり、肺胞上皮の修復、界面活性剤の代謝、肺損傷、毒素、治療薬に対する細胞応答に関するメカニズム研究の信頼できるプラットフォームとして役立つ。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。