RLE-6TN

Az RLE-6TN sejtvonal egy immortalizált patkány alveoláris II-es típusú epithel sejtvonal, amely felnőtt Fischer 344 patkányokból származik. Az RLE-6TN spontán immortalizációval jött létre az SV40-T antigén génjének primer alveoláris II-es típusú epithelsejtekbe történő bevitelére irányuló kísérletek során. Az SV40-T antigénnel pozitívan transzfektált RLE-6T-vel ellentétben az RLE-6TN sejtek nem expresszálják a T-antigén gént. Ennek ellenére az RLE-6TN sejtek megtartják az alveoláris II-es típusú sejtekre jellemző kritikus morfológiai és funkcionális jellemzőket, beleértve a citokeratin expressziót és a lipidtartalmú lamelláris zárványtestek jelenlétét.

Az RLE-6TN sejteket széles körben használják in vitro modellként a tüdő epithelsejtek biológiájának, az alveoláris működésnek és a különböző fiziológiai és patológiai ingerekre adott válaszoknak a vizsgálatára. Különösen fontosak a Na-K-ATPáz szabályozásának és aktivitásának tanulmányozásához az alveoláris epithelsejtekben. A Na-K-ATPáz alapvető fontosságú a sejtek iongradiensének fenntartásában és a transzepithelialis iontranszportban, amely folyamatok kritikusak a tüdő alveoláris folyadéktisztulása szempontjából. Vizsgálatokban kimutatták, hogy a pajzsmirigyhormon (T3) az RLE-6TN sejtekben úgy serkenti a Na-K-ATPáz aktivitását, hogy a transzkripció növelése helyett inkább a plazmamembránba való transzlokációját fokozza, ami egy új, gyors szabályozási mechanizmusra világít rá.

Az RLE-6TN sejtek stabil növekedést mutatnak, közel diploid kariotípus stabilitással, és nem daganatkeltőek meztelen egerekben. Negatívak az alkalikus foszfatáz aktivitásra, de pozitívan festődnek a 8-as, 18-as és 19-es citokeratinokra, ami megerősíti epithelialis eredetüket. Az RLE-6TN sejtek hosszú távon fenntarthatók tenyészetben, és megbízható platformként szolgálnak az alveoláris epithel javításának, a felületaktív anyagcserének, valamint a tüdősérülésre, toxinokra és terápiás szerekre adott sejtválaszoknak a mechanisztikus vizsgálatához.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban