RLE-6TN

La lignée cellulaire RLE-6TN est une lignée de cellules épithéliales alvéolaires de type II de rat immortalisées, dérivée de rats Fischer 344 adultes. La lignée RLE-6TN a été établie à la suite d’une immortalisation spontanée survenue lors de tentatives d’introduction du gène de l’antigène T du SV40 dans des cellules épithéliales alvéolaires de type II primaires. Contrairement à sa contrepartie, la lignée RLE-6T, qui a été transfectée avec succès par le gène de l’antigène T du SV40, les cellules RLE-6TN n’expriment pas ce gène. Malgré cela, les cellules RLE-6TN conservent les caractéristiques morphologiques et fonctionnelles essentielles propres aux cellules alvéolaires de type II, notamment l’expression de la cytokératine et la présence de corps d’inclusion lamellaires contenant des lipides.

Les cellules RLE-6TN ont été largement utilisées comme modèle in vitro pour étudier la biologie des cellules épithéliales pulmonaires, la fonction alvéolaire et les réponses à divers stimuli physiologiques et pathologiques. Elles sont particulièrement pertinentes pour l’étude de la régulation et de l’activité de la Na-K-ATPase dans les cellules épithéliales alvéolaires. La Na-K-ATPase est essentielle au maintien des gradients ioniques cellulaires et au transport transépithélial des ions, processus cruciaux pour l’élimination du liquide alvéolaire dans les poumons. Des études ont montré que l’hormone thyroïdienne (T3) stimule l’activité de la Na-K-ATPase dans les cellules RLE-6TN en favorisant sa translocation vers la membrane plasmique plutôt qu’en augmentant sa transcription, ce qui met en évidence un mécanisme de régulation nouveau et rapide.

Les cellules RLE-6TN présentent une croissance stable, avec une stabilité caryotypique quasi-diploïde, et ne sont pas tumorigènes chez la souris nue. Elles sont négatives pour l’activité de la phosphatase alcaline, mais se colorent positivement pour les cytokératines 8, 18 et 19, ce qui confirme leur origine épithéliale. Les cellules RLE-6TN peuvent être maintenues en culture à long terme et constituent une plateforme fiable pour les études mécanistiques sur la réparation de l’épithélium alvéolaire, le métabolisme du surfactant et les réponses cellulaires aux lésions pulmonaires, aux toxines et aux agents thérapeutiques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.