Skip to content
RLE-6TN
Tissue
ปอด
Synonyms
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative

Documents

RLE-6TN

Cell line · Product number 305350

The RLE-6TN cell line is an immortalized rat alveolar type II epithelial cell line derived from adult Fischer 344 rats. RLE-6TN was established through sp...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ RLE-6TN เป็นเซลล์ไลน์ของเซลล์เยื่อบุผิวชนิดที่สองของถุงลมปอดหนูสายพันธุ์ Fischer 344 ที่ถูกทำให้เป็นอมตะ ซึ่งได้มาจากหนูโตเต็มวัย RLE-6TN ถูกสร้างขึ้นโดยการทำให้เป็นอมตะโดยธรรมชาติในระหว่างความพยายามที่จะนำยีนแอนติเจน SV40-T เข้าสู่เซลล์เยื่อบุผิวชนิดที่สองของถุงลมปอดหนูโดยตรงไม่เหมือนกับเซลล์ RLE-6T ซึ่งถูกถ่ายโอนยีนด้วยแอนติเจน SV40-T อย่างสมบูรณ์ เซลล์ RLE-6TN ไม่แสดงออกของยีนแอนติเจน T อย่างไรก็ตาม เซลล์ RLE-6TN ยังคงมีลักษณะทางสัณฐานวิทยาและหน้าที่ที่สำคัญซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์ปอดชนิดที่สอง (alveolar type II cells) รวมถึงการแสดงออกของไซโตเคราติน และการมีอยู่ของลิปิด-คอนเทนิง แลเมลลาร์ อินคลูชั่น บอดี้

เซลล์ RLE-6TN ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองเพื่อศึกษาชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวปอด การทำงานของถุงลมปอด และการตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นทางสรีรวิทยาและพยาธิสภาพต่างๆ เซลล์เหล่านี้มีความเกี่ยวข้องโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาการควบคุมและกิจกรรมของ Na-K-ATPase ในเซลล์เยื่อบุผิวถุงลม Na-K-ATPase มีความจำเป็นในการรักษาความชันของไอออนภายในเซลล์และการขนส่งไอออนข้ามเยื่อบุผิว ซึ่งเป็นกระบวนการสำคัญสำหรับการขจัดของเหลวในถุงลมปอดในการศึกษา พบว่าฮอร์โมนไทรอยด์ (T3) สามารถกระตุ้นกิจกรรมของ Na-K-ATPase ในเซลล์ RLE-6TN ได้โดยการเพิ่มการเคลื่อนย้ายไปยังเยื่อหุ้มเซลล์แทนที่จะเพิ่มการถอดรหัสของมัน ซึ่งเน้นให้เห็นถึงกลไกการควบคุมใหม่ที่มีความรวดเร็ว

เซลล์ RLE-6TN แสดงการเจริญเติบโตที่เสถียร มีความเสถียรของโครโมโซมใกล้เคียงกับไดพลอยด์ และไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูเมาส์ที่ไม่มีขน เซลล์เหล่านี้มีผลลบสำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ฟอสฟาเตสอัลคาไลน์ แต่สามารถย้อมติดสีบวกสำหรับไซโตเคราติน 8, 18 และ 19 ยืนยันถึงต้นกำเนิดจากเยื่อบุผิวเซลล์ RLE-6TN สามารถรักษาไว้ได้ในระยะยาวในวัฒนธรรม และทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่น่าเชื่อถือสำหรับการศึกษาเชิงกลไกเกี่ยวกับการซ่อมแซมเยื่อบุผิวถุงลม, การเผาผลาญสารลดแรงตึงผิว, และการตอบสนองของเซลล์ต่อการบาดเจ็บของปอด, สารพิษ, และสารบำบัด

Tissue
ปอด
Synonyms
  • Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่ ไม่ ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่ไม่มีขน
Karyotype
มีการรายงานว่าเซลล์ยังคงมีลักษณะใกล้เคียงกับไดพลอยด์และมีความคงที่ทางโครโมโซมตั้งแต่การผ่านรุ่นที่ 19-70 โดยมีเซลล์ร้อยละ 50 หรือมากกว่าที่มีโครโมโซม 42 แท่ง ในรุ่นที่ 37 พบการเคลื่อนย้ายระหว่างโครโมโซมที่ 1 และ 15 ซึ่งส่งผลให้เกิดไตรโซมีของแขน q ของโครโมโซมที่ 1

04Identifiers

Citation
RLE-6TN (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305350)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_4693

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ไซโตเคราติน 8; ไซโตเคราติน 19
Viruses
เอสวี40

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 5%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
56 วัน