RLE-6TN

إن خط الخلايا RLE-6TN هو خط خلايا طلائية سنخية من النوع الثاني من الفئران من النوع الثاني غير المخلد المستخرج من فئران فيشر 344 البالغة. تم إنشاء RLE-6TN من خلال الخلود التلقائي أثناء محاولات إدخال جين مستضد SV40-T في الخلايا الظهارية السنخية الأولية من النوع الثاني. وخلافاً لنظيرتها RLE-6T، التي تم نقلها بشكل إيجابي مع مستضد SV40-T، فإن خلايا RLE-6TN لا تعبر عن جين المستضد T. وعلى الرغم من ذلك، تحتفظ خلايا RLE-6TN بالسمات المورفولوجية والوظيفية الحرجة المميزة للخلايا السنخية من النوع الثاني، بما في ذلك التعبير عن السيتوكيراتين ووجود أجسام متضمنة صفائحية تحتوي على الدهون.

وقد استُخدمت خلايا RLE-6TN على نطاق واسع كنموذج في المختبر لدراسة بيولوجيا الخلايا الظهارية الرئوية والوظيفة السنخية والاستجابات لمختلف المحفزات الفسيولوجية والمرضية. وهي ذات أهمية خاصة لدراسة تنظيم ونشاط إنزيم Na-K-ATPase في الخلايا الظهارية السنخية. يعد Na-K-ATPase ضروريًا للحفاظ على تدرجات الأيونات الخلوية ونقل الأيونات عبر الظهارة، وهي عمليات حاسمة لتخليص السائل السنخي في الرئتين. في الدراسات، ثبت أن هرمون الغدة الدرقية (T3) يحفز نشاط Na-K-ATPase في خلايا RLE-6TN من خلال تعزيز انتقاله إلى غشاء البلازما بدلاً من زيادة نسخه، مما يسلط الضوء على آلية تنظيمية جديدة وسريعة.

تُظهر خلايا RLE-6TN نموًا مستقرًا، مع ثبات النمط النووي شبه ثنائي الصبغيات، وهي غير مولدة للأورام في الفئران العارية. وهي سلبية بالنسبة لنشاط الفوسفاتيز القلوي ولكن صبغتها إيجابية بالنسبة للسيتوكيراتين 8 و18 و19، مما يؤكد أصلها الظهاري. يمكن الاحتفاظ بخلايا RLE-6TN على المدى الطويل في المستنبت، وهي بمثابة منصة موثوقة للدراسات الميكانيكية حول إصلاح الظهارة السنخية واستقلاب المواد الخافضة للتوتر السطحي والاستجابات الخلوية لإصابة الرئة والسموم والعوامل العلاجية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان