Langsung ke isi
U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo
Tisu
Tulang
Penyakit
Osteosarkoma

U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo

Cell line · Nomor produk 300448

U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo adalah lini sel hasil rekayasa genetika yang berasal dari sel osteosarkoma manusia U-2 OS. Lini sel ini telah dimodifikasi menggunakan...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo adalah garis sel yang direkayasa secara genetik yang berasal dari sel osteosarkoma U-2 OS manusia. Garis sel ini telah dimodifikasi menggunakan teknologi CRISPR-Cas9 untuk memasukkan HaloTag pada lokus gen NUP96. NUP96, bagian dari kompleks pori nuklir, memainkan peran penting dalam transportasi nuklir dan regulasi seluler. Pengenalan HaloTag memungkinkan visualisasi yang tepat dan karakterisasi biokimiawi dari dinamika dan interaksi NUP96 di dalam sel.

Dengan memfasilitasi perlekatan kovalen ligan fluoresen atau probe lainnya, HaloTag memungkinkan pencitraan waktu nyata dan menyediakan alat yang ampuh untuk mempelajari mekanisme transpor nuklir dalam sel hidup. Klon khusus ini, nomor 252, telah dipilih karena ekspresi stabil dari HaloTagged NUP96, memastikan kinerja yang konsisten dalam pengaturan eksperimental. Fitur ini membuatnya sangat cocok untuk teknik pencitraan resolusi tinggi dan studi interaksi molekuler, sehingga mendukung penelitian lanjutan dalam biologi seluler, khususnya dalam konteks fungsi nuklir dan regulasi genetik.

Tisu
Tulang
Penyakit
Osteosarkoma

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-CRISPR-NUP96-Halo, clone 252) contains a CRISPR-edited NUP96-Halo fusion generated via lentiviral delivery, enabling fluorescent labeling of nuclear pore complexes. The modification is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo (nomor katalog Cytion 300448)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FI
Nasabah penyimpanan
Laboratorium Ellenberg (Ellenberg Lab) (EMBL)

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
NUP96-Halo (protein kompleks pori nuklir endogen 96, ditandai dengan Halo)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukosa, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natrium piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820200a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
15 tahun
Etnis
Kaukasia