U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo

La lignée cellulaire U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo est une lignée cellulaire génétiquement modifiée dérivée des cellules U-2 OS d’ostéosarcome humain. Cette lignée cellulaire a été modifiée à l’aide de la technologie CRISPR-Cas9 afin d’incorporer un HaloTag au locus du gène NUP96. La protéine NUP96, qui fait partie du complexe des pores nucléaires, joue un rôle essentiel dans le transport nucléaire et la régulation cellulaire. L’introduction du HaloTag permet la visualisation précise et la caractérisation biochimique de la dynamique et des interactions de la protéine NUP96 au sein de la cellule.

En facilitant la liaison covalente de ligands fluorescents ou d’autres sondes, le HaloTag permet l’imagerie en temps réel et constitue un outil puissant pour l’étude des mécanismes de transport nucléaire dans les cellules vivantes. Ce clone particulier, le numéro 252, a été sélectionné pour son expression stable de la protéine NUP96 marquée par le HaloTag, ce qui garantit des performances constantes dans les montages expérimentaux. Cette caractéristique le rend particulièrement adapté aux techniques d’imagerie à haute résolution et aux études d’interactions moléculaires, soutenant ainsi la recherche de pointe en biologie cellulaire, notamment dans le contexte de la fonction nucléaire et de la régulation génétique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.