Cellules U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

La lignée cellulaire U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP est une lignée cellulaire génétiquement modifiée dérivée de la lignée parente U-2 OS d’ostéosarcome humain. Cette lignée cellulaire intègre une insertion ciblée du marqueur monomérique « Enhanced Green Fluorescent Protein » (mEGFP) au locus du gène NUP96, réalisée grâce à la technologie d’édition génétique CRISPR-Cas9. La protéine NUP96, qui fait partie du complexe des pores nucléaires, est essentielle au transport nucléaire; sa fusion avec la mEGFP permet de visualiser en temps réel la dynamique des pores nucléaires sous microscopie à fluorescence, fournissant ainsi des informations précieuses sur les mécanismes de transport nucléaire et le trafic nucléocytoplasmique.

Ce clone spécifique, numéroté 195, a été sélectionné pour son expression stable de la protéine de fusion NUP96-mEGFP et conserve les caractéristiques typiques de la lignée U-2 OS, notamment une structure cytosquelettique robuste, essentielle dans les études liées à la migration des cellules cancéreuses et aux métastases. L’application de la technologie CRISPR garantit une modification génétique précise, minimisant ainsi les effets hors cible qui pourraient compromettre l’intégrité des résultats expérimentaux. Cela rend le clone U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP n° 195 particulièrement utile pour les techniques d’imagerie à haute résolution et les études détaillées de l’architecture cellulaire, contribuant ainsi à la recherche de pointe en biologie cellulaire, en recherche sur le cancer et sur les phénomènes de transport nucléaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.