Κύτταρα U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

Η U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP είναι μια γενετικά τροποποιημένη κυτταρική σειρά που προέρχεται από τη μητρική σειρά ανθρώπινου οστεοσαρκώματος U-2 OS. Αυτή η κυτταρική σειρά ενσωματώνει μια στοχευμένη εισαγωγή της μονομερούς ενισχυμένης πράσινης φθορίζουσας πρωτεΐνης (mEGFP) στον γονιδιακό τόπο NUP96, η οποία επιτυγχάνεται μέσω της τεχνολογίας γονιδιακής επεξεργασίας CRISPR-Cas9. Το NUP96, μέρος του συμπλόκου του πυρηνικού πόρου, είναι απαραίτητο για την πυρηνική μεταφορά και η σύντηξή του με την mEGFP επιτρέπει την οπτικοποίηση σε πραγματικό χρόνο της δυναμικής του πυρηνικού πόρου υπό φθορίζουσα μικροσκοπία, παρέχοντας πολύτιμες πληροφορίες για τους μηχανισμούς πυρηνικής μεταφοράς και την πυρηνικοκυτταροπλασματική διακίνηση.

Ο συγκεκριμένος κλώνος, με αριθμό 195, έχει επιλεγεί για τη σταθερή έκφραση της πρωτεΐνης σύντηξης NUP96-mEGFP και διατηρεί τα τυπικά χαρακτηριστικά της σειράς U-2 OS, συμπεριλαμβανομένης μιας ισχυρής κυτταροσκελετικής δομής, η οποία είναι κρίσιμη σε μελέτες που σχετίζονται με τη μετανάστευση και τη μετάσταση καρκινικών κυττάρων. Η εφαρμογή της τεχνολογίας CRISPR διασφαλίζει την ακριβή γονιδιακή επεξεργασία, ελαχιστοποιώντας τις εκτός στόχου επιδράσεις που θα μπορούσαν να θέσουν σε κίνδυνο την ακεραιότητα των πειραματικών αποτελεσμάτων. Αυτό καθιστά τον κλώνο U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP αριθ. 195 ιδιαίτερα χρήσιμο για τεχνικές απεικόνισης υψηλής ανάλυσης και λεπτομερείς μελέτες κυτταρικής αρχιτεκτονικής, βοηθώντας στην προηγμένη έρευνα στην κυτταρική βιολογία, την έρευνα του καρκίνου και τα φαινόμενα πυρηνικής μεταφοράς.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης