U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

Η U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple είναι μια γενετικά τροποποιημένη κυτταρική σειρά οστεοσαρκώματος που προέρχεται από την ανθρώπινη κυτταρική σειρά U-2 OS, γνωστή για τα ισχυρά χαρακτηριστικά ανάπτυξής της και τη χρησιμότητά της σε διάφορες βιολογικές μελέτες. Ο συγκεκριμένος κλώνος έχει τροποποιηθεί με τη χρήση της τεχνολογίας γονιδιακής επεξεργασίας CRISPR/Cas9 για την ενσωμάτωση της mMaple, μιας φωτομετατρεπόμενης φθορίζουσας πρωτεΐνης, στο γονίδιο NUP96. Η πρωτεΐνη mMaple επιτρέπει προηγμένες τεχνικές απεικόνισης, όπως η απεικόνιση ζωντανών κυττάρων και η μικροσκοπία υπερ-ανάλυσης, παρέχοντας δυναμική εικόνα της συμπεριφοράς του συμπλόκου των πυρηνικών πόρων (NPC) και των κυτταρικών μηχανισμών εισαγωγής-εξαγωγής μέσω του πυρηνικού περιβλήματος.

Το γονίδιο NUP96, το οποίο κωδικοποιεί ένα κρίσιμο συστατικό του NPC, είναι ζωτικής σημασίας για την πυρηνοκυτταροπλασματική μεταφορά. Η μεταβολή του NUP96 μπορεί να επηρεάσει όχι μόνο τους μηχανισμούς μεταφοράς αλλά και τη συνολική πυρηνική αρχιτεκτονική και λειτουργία. Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμεύει επομένως ως εξαιρετικό μοντέλο για τη μελέτη των παθολογιών που σχετίζονται με το NPC και του ρόλου της πυρηνικής μεταφοράς στον κυτταρικό μεταβολισμό και τη σηματοδότηση. Η ενσωμάτωση του mMaple στο NUP96 επιτρέπει την παρακολούθηση σε πραγματικό χρόνο και την οπτικοποίηση της δυναμικής του NUP96 in vivo, καθιστώντας το ένα απαραίτητο εργαλείο για τους ερευνητές που επικεντρώνονται στις μελέτες του κυτταρικού πυρήνα και για εκείνους που διερευνούν τις επιπτώσεις των δυσλειτουργιών του NPC σε ασθένειες όπως ο καρκίνος και οι ιογενείς λοιμώξεις.

Ως εξειδικευμένο εργαλείο, ο κλώνος U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple no.16 υποστηρίζει απεικόνιση υψηλής ανάλυσης και παρέχει σημαντικά δεδομένα σχετικά με τη χωρική και χρονική κατανομή των συστατικών του NPC. Είναι ιδιαίτερα πολύτιμος για πειράματα που απαιτούν λεπτομερή ανάλυση της γονιδιακής έκφρασης, του πρωτεϊνικού εντοπισμού και της πυρηνικής μεταφοράς υπό φυσιολογικές και παθολογικές συνθήκες, διευκολύνοντας τη βαθύτερη κατανόηση των κυτταρικών διεργασιών σε μοριακό επίπεδο.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης