U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple on geneettisesti muunnettu osteosarkoomasolulinja, joka on johdettu ihmisen U-2 OS-solulinjasta, joka on tunnettu vahvoista kasvuominaisuuksistaan ja hyödyllisyydestään erilaisissa biologisissa tutkimuksissa. Tätä kloonia on muokattu CRISPR/Cas9-geeninmuokkaustekniikalla siten, että NUP96-geeniin on sisällytetty mMaple, valokonvertoituva fluoresoiva proteiini. MMaple-proteiini mahdollistaa kehittyneet kuvantamistekniikat, kuten elävän solun kuvantamisen ja superresoluutiomikroskopian, ja tarjoaa dynaamisen näkemyksen ydinhuokoskompleksin (NPC) käyttäytymisestä ja solujen tuonti- ja vientimekanismeista ydinkuoren läpi.

NUP96-geeni, joka koodaa NPC:n keskeistä komponenttia, on elintärkeä nukleosytoplasman kuljetukselle. NUP96:n muutokset voivat vaikuttaa kuljetusmekanismien lisäksi myös ydinkeskustan yleiseen arkkitehtuuriin ja toimintaan. Tämä solulinja toimii näin ollen erinomaisena mallina NPC:hen liittyvien patologioiden ja ydinkuljetuksen roolin tutkimiseen solujen aineenvaihdunnassa ja signaloinnissa. MMaplen integrointi NUP96:een mahdollistaa NUP96:n dynamiikan reaaliaikaisen seurannan ja visualisoinnin in vivo, mikä tekee siitä välttämättömän työkalun tutkijoille, jotka keskittyvät soluytimen tutkimukseen ja tutkivat NPC:n toimintahäiriöiden vaikutuksia sairauksiin, kuten syöpään ja virusinfektioihin.

Erikoistyökaluna U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple-klooni nro 16 tukee korkearesoluutioista kuvantamista ja tarjoaa merkittävää tietoa NPC-komponenttien alueellisesta ja ajallisesta jakautumisesta. Se on erityisen arvokas kokeissa, jotka edellyttävät geeniekspression, proteiinien lokalisoitumisen ja ydinkuljetuksen yksityiskohtaista analysointia fysiologisissa ja patologisissa olosuhteissa, mikä helpottaa soluprosessien syvempää ymmärtämistä molekyylitasolla.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa