U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

Az U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple egy genetikailag módosított osteosarcoma sejtvonal, amely a humán U-2 OS sejtvonalból származik, amely robusztus növekedési jellemzőiről és különböző biológiai vizsgálatokban való hasznosságáról ismert. Ezt a klónt a CRISPR/Cas9 génszerkesztési technológiával módosították, hogy a NUP96 génbe beépítsék az mMaple-t, egy fotokonvertálható fluoreszcens fehérjét. Az mMaple fehérje lehetővé teszi a fejlett képalkotási technikák, például az élő sejtek képalkotása és a szuperfelbontású mikroszkópia alkalmazását, dinamikus betekintést nyújtva a nukleáris póruskomplex (NPC) viselkedésébe és a sejtek import-export mechanizmusaiba a magburkon keresztül.

A NUP96 gén, amely az NPC egyik kulcsfontosságú komponensét kódolja, létfontosságú a nukleocitoplazmatikus szállításhoz. A NUP96 megváltozása nemcsak a transzportmechanizmusokat, hanem az általános nukleáris architektúrát és funkciót is befolyásolhatja. Ez a sejtvonal így kiváló modellként szolgál a NPC-vel kapcsolatos kórképek, valamint a nukleáris transzportnak a sejtek anyagcseréjében és jelátvitelében játszott szerepének tanulmányozására. Az mMaple integrálása a NUP96-ba lehetővé teszi a NUP96 dinamikájának valós idejű követését és vizualizálását in vivo, így nélkülözhetetlen eszközzé válik a sejtmagok vizsgálatára összpontosító kutatók számára, valamint azok számára, akik a NPC működési zavarainak következményeit vizsgálják olyan betegségekben, mint a rák és a vírusfertőzések.

Speciális eszközként az U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple 16. számú klónja támogatja a nagy felbontású képalkotást, és jelentős adatokat szolgáltat az NPC-komponensek térbeli és időbeli eloszlásáról. Különösen értékes a génexpresszió, a fehérje lokalizáció és a nukleáris transzport részletes elemzését fiziológiai és patológiás körülmények között igénylő kísérletekhez, elősegítve a sejtfolyamatok mélyebb megértését molekuláris szinten.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban